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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药理学 » 我的RAW264.7细胞为什么一直分化，实验无法进行啊，非常感谢
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880110sj

金虫 (正式写手)

[求助] 我的RAW264.7细胞为什么一直分化，实验无法进行啊，非常感谢

本人现在在培养RAW264.7，培养基是DMEM高糖，10%胎牛血清，都是Gibico的，刚开始是贴壁养，用的是细胞刮传代，后来发现细胞严重分化，就改为悬浮培养，但是现在细胞还是会贴壁，然后分化，分化的状态是伸出许多的伪足，这样就直接导致我测试空白组和LPS刺激的模型组之间NO含量没有什么差异，我用的是南京建成的NO试剂盒，目前真的不知道问题出现在哪里了，请各位帮个忙吧，非常感谢！
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1楼2012-08-28 16:15:24
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880110sj

金虫 (正式写手)
880110sj: 回帖置顶 2012-09-01 09:55:59
拜托养过RAW264.7细胞的同学帮帮忙吧，万分感谢！
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2楼2012-09-01 09:55:52
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TCMdoctor

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

880110sj: 回帖置顶 2013-09-29 15:27:36
我也在养，也会出现分化的现象。
我们是这么做的，用PBS洗两道，然后加入DMEM培养基，吹打管轻轻吹打，一般状态比较好一点的会被吹打下来，换培养瓶培养这些细胞，一般这样传代三四次细胞状态就调整回来了。
如果还是不行，你重新复苏一支吧
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5楼2012-09-20 15:06:49
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普通回帖

sntyc

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

这个细胞本身就是贴壁生长  如果你细胞状态确实不好 那么就用最简单的方法 挑选好的细胞克隆慢慢扩增吧
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3楼2012-09-07 11:04:14
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jiangchunyong

荣誉版主 (文坛精英)

【答案】应助回帖

我也在养啊 没什么经验 哎 有时候还污染
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4楼2012-09-07 11:15:37
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qlssys

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

请问你们用的培养基是高糖还是低糖滴，。。DMEM还是1640。。能够指导一下吗？？
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6楼2012-12-23 22:29:02
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爱知识-圆圆

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

请问你怎么弄成悬浮培养呢？这个细胞贴壁很牢，我们都是用刮刀。时间养久了是会变形，所以要经常冻存细胞，经常复苏新的细胞。
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whatever I do,do my best!
7楼2013-04-10 14:27:10
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风中的羽翼_

铜虫 (小有名气)
你确定传代次数过多后悔分化？怎么知道会分化？
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8楼2013-06-20 22:54:38
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880110sj

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by TCMdoctor at 2012-09-20 15:06:49
我也在养，也会出现分化的现象。
我们是这么做的，用PBS洗两道，然后加入DMEM培养基，吹打管轻轻吹打，一般状态比较好一点的会被吹打下来，换培养瓶培养这些细胞，一般这样传代三四次细胞状态就调整回来了。
如果 ...

代我女朋友非常感谢你的回复，她现在已经毕业了，谢谢~
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9楼2013-09-29 15:28:29
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