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爱吃肉的小羊

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教一个养细胞的问题!急!

请好心人帮忙看看细胞,这是40倍镜下的H9C2细胞,细胞里面外面有一些颗粒性物质,三角定位法感觉细胞外液有些小黑点会移动,但大多数不会,请问是不是污染了?培养基没有浑浊,细胞生长速度也还可以,但是细胞死亡率挺高,如果污染了?是什么污染,支原体吗?黑胶虫?该怎么办呢?很急啊~
请教一个养细胞的问题!急!
H9C2 11.6 22 WHY.jpg
请教一个养细胞的问题!急!-1
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请教一个养细胞的问题!急!-2
H9C2 4.2 11.4  .jpg



[ Last edited by 爱吃肉的小羊 on 2013-11-7 at 20:46 ]
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小羊慢慢爬
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dongxie1982

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+3, 谢谢参与 2013-11-08 09:24:46
之前我们也出现这种情况,首先,支原体在光学显微镜下是看不到,用支原体检测试剂盒检测,黑胶虫?有这样的生物?细胞在状态不好或者是进入程序凋亡时,自溶后细胞器散落在培养基,形成黑色小颗粒,建议:1、将实验室、生物安全柜、二碳箱彻底消毒灭菌;2更换新的培养基、胰酶3、重新复苏细胞(前提是之前的细胞是没受过污染的)
2楼2013-11-07 21:29:28
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pypsak

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-11-08 09:25:28
这种可能是支原体污染,小黑点支原体进入细胞后的细胞碎片,先检测一下支原体,看是不是的
3楼2013-11-08 08:46:55
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爱吃肉的小羊

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by dongxie1982 at 2013-11-07 21:29:28
之前我们也出现这种情况,首先,支原体在光学显微镜下是看不到,用支原体检测试剂盒检测,黑胶虫?有这样的生物?细胞在状态不好或者是进入程序凋亡时,自溶后细胞器散落在培养基,形成黑色小颗粒,建议:1、将实验 ...

请问能不能用点抗生素试试?红霉素有效吗?
小羊慢慢爬
4楼2013-11-08 08:53:20
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pypsak

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你先检测一下,红霉素没用
5楼2013-11-08 10:26:05
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pypsak

金虫 (正式写手)

6楼2013-11-08 10:26:47
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pypsak

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

这个应该是支原体污染可以参考这个http://wenku.baidu.com/view/d8f6f6a3a0116c175f0e485f.html
7楼2013-11-12 10:43:18
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疏枝横夕烟

新虫 (初入文坛)

您好,您这个问题解决了么?我现在养H9c2也遇到了同样的问题,一直找不出原因,实验都没法往下进行,愁死了……
8楼2014-12-18 20:31:12
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你的样子。

铜虫 (初入文坛)

黑胶虫,原因初步定于血清,胰酶,以及对细胞生长有利,营养很足的生长因子之类的。建议换新的。

发自小木虫Android客户端
9楼2016-06-25 07:58:00
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彼岸花89

新虫 (小有名气)

10楼2016-06-26 11:26:23
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