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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教一个养细胞的问题！急！
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爱吃肉的小羊

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教一个养细胞的问题！急！

请好心人帮忙看看细胞，这是40倍镜下的H9C2细胞，细胞里面外面有一些颗粒性物质，三角定位法感觉细胞外液有些小黑点会移动，但大多数不会，请问是不是污染了？培养基没有浑浊，细胞生长速度也还可以，但是细胞死亡率挺高，如果污染了？是什么污染，支原体吗？黑胶虫？该怎么办呢？很急啊~
请教一个养细胞的问题！急！
H9C2 11.6 22 WHY.jpg
请教一个养细胞的问题！急！-1
h9c2 21  11.2  .jpg


请教一个养细胞的问题！急！-2
H9C2 4.2 11.4  .jpg



[ Last edited by 爱吃肉的小羊 on 2013-11-7 at 20:46 ]
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小羊慢慢爬
1楼 2013-11-07 20:44:53
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dongxie1982

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+3, 谢谢参与 2013-11-08 09:24:46
之前我们也出现这种情况，首先，支原体在光学显微镜下是看不到，用支原体检测试剂盒检测，黑胶虫？有这样的生物？细胞在状态不好或者是进入程序凋亡时，自溶后细胞器散落在培养基，形成黑色小颗粒，建议：1、将实验室、生物安全柜、二碳箱彻底消毒灭菌；2更换新的培养基、胰酶3、重新复苏细胞（前提是之前的细胞是没受过污染的）
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2楼2013-11-07 21:29:28
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pypsak

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-11-08 09:25:28
这种可能是支原体污染，小黑点支原体进入细胞后的细胞碎片，先检测一下支原体，看是不是的
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3楼2013-11-08 08:46:55
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爱吃肉的小羊

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dongxie1982 at 2013-11-07 21:29:28
之前我们也出现这种情况，首先，支原体在光学显微镜下是看不到，用支原体检测试剂盒检测，黑胶虫？有这样的生物？细胞在状态不好或者是进入程序凋亡时，自溶后细胞器散落在培养基，形成黑色小颗粒，建议：1、将实验 ...

请问能不能用点抗生素试试？红霉素有效吗？
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小羊慢慢爬
4楼2013-11-08 08:53:20
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pypsak

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你先检测一下，红霉素没用
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5楼2013-11-08 10:26:05
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pypsak

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

http://wenku.baidu.com/view/9ec9e9f3f8c75fbfc77db2f6.html操作
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6楼2013-11-08 10:26:47
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pypsak

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

这个应该是支原体污染可以参考这个http://wenku.baidu.com/view/d8f6f6a3a0116c175f0e485f.html
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7楼2013-11-12 10:43:18
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疏枝横夕烟

新虫 (初入文坛)
您好，您这个问题解决了么？我现在养H9c2也遇到了同样的问题，一直找不出原因，实验都没法往下进行，愁死了……
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8楼2014-12-18 20:31:12
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你的样子。

铜虫 (初入文坛)
黑胶虫，原因初步定于血清，胰酶，以及对细胞生长有利，营养很足的生长因子之类的。建议换新的。

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9楼2016-06-25 07:58:00
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彼岸花89

新虫 (小有名气)
我觉得是黑胶虫污染

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10楼2016-06-26 11:26:23
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