应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 综合其他 » 白鼠骨髓细胞培养的一个问题，棘手！
101/1返回列表
查看: 2302  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

westlover

银虫 (著名写手)

[求助] 白鼠骨髓细胞培养的一个问题，棘手！

从四周雌性白鼠胫骨中取得细胞，培养6天后显微镜下观察饱和度为70-80%，大部分贴壁完好，有少量圆形、悬浮细胞。更换培养培养液时，先用PBS冲洗2次然后加入新鲜培养液，重新放到显微镜下观察时发现：90%的细胞变成圆形，而且几乎从培养皿底部脱离，而且细胞数目比换培养液前少了很多。
这时什么原因呢？
本打算明天接种细胞到试样上，看来不行了！
有类似经历的虫友吗？
可以保证PBS和培养液没有问题。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-07-04 13:57:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黄昏过客

金虫 (正式写手)
★
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2011-07-05 11:05:20
培养到六天才换液的？估计是分泌物过多，细胞贴壁不是很好吧，一洗就下来了，猜测哈，小虾米期待大侠的解答
赞一下(1人) 回复此楼
从小与世抗争，无奈轮回难过
2楼2011-07-04 15:12:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

westlover

银虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by 黄昏过客 at 2011-07-04 15:12:43:
培养到六天才换液的？估计是分泌物过多，细胞贴壁不是很好吧，一洗就下来了，猜测哈，小虾米期待大侠的解答

sorry，忘了说了，3天的时候也换过一次，当时也是细胞都浮起来了。
赞一下 回复此楼
3楼2011-07-04 16:36:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黄昏过客

金虫 (正式写手)
★
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2011-07-05 11:05:40
引用回帖:
Originally posted by westlover at 2011-07-04 16:36:12:
sorry，忘了说了，3天的时候也换过一次，当时也是细胞都浮起来了。

如果那样的话，个人觉得那应该是细胞的问题，细胞贴壁效果不好。
赞一下(1人) 回复此楼
从小与世抗争，无奈轮回难过
4楼2011-07-04 17:04:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jingwang7793

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2011-07-05 11:05:29
骨髓中细胞种类很多，要清楚你得到的是那种细胞。
赞一下(1人) 回复此楼
JingWang
5楼2011-07-05 04:47:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

westlover

银虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by jingwang7793 at 2011-07-05 04:47:34:
骨髓中细胞种类很多，要清楚你得到的是那种细胞。

对此我也不甚了了，培养液中没有添加分化诱导药物，师兄说，换过几次培养液后，悬浮细胞基本会被清洗出去，贴壁的细胞就会是造骨细胞，我也不清楚……
赞一下 回复此楼
6楼2011-07-05 08:47:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

westlover

银虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by 黄昏过客 at 2011-07-04 17:04:59:
如果那样的话，个人觉得那应该是细胞的问题，细胞贴壁效果不好。

是吗？可是别人从骨髓细胞里得出的贴壁细胞贴壁很好啊，换培养液的时候并不会从培养皿底部脱离。还能测试3小时附着率，3小时细胞形态等等，如果我的细胞贴壁不好，3小时后就算在试样表面铺展的很好，也会被PBS冲洗掉的吧？那就太郁闷了！今天是培养的第七天，应该接种了，也不知道是不是好些了。
赞一下 回复此楼
7楼2011-07-05 08:51:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

westlover

银虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by 黄昏过客 at 2011-07-04 17:04:59:
如果那样的话，个人觉得那应该是细胞的问题，细胞贴壁效果不好。

今天打算给它传代一下，看看细胞在新的培养皿中能不能牢固贴壁，那样，种植的时候骨髓细胞就是第二代了，唉，不完美，文献中都是培养七天后直接种植。
赞一下 回复此楼
8楼2011-07-05 08:56:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bonesc12

新虫 (初入文坛)
你好，有做和骨有关的研究吗？你是否有机会申请到国家公派的名额？我们美国这边有个国内访问学者或博士生联合培养的位置。如果感兴趣请和我联系。Email: fengdj100@hotmail.com 谢谢。德江
赞一下 回复此楼
9楼2012-07-29 22:43:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

westlover

银虫 (著名写手)
谢谢啦，真心地。我现在在日本是公派的读博，做的是骨内植入钛合金表面处理，明年7月毕业呢。希望到时候你那边的职位还在。对了，似乎那个职位不提供奖学金吧？
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2012-07-30 07:50:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 westlover 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭