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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 综合其他 » 白鼠骨髓细胞培养的一个问题，棘手！
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westlover

银虫 (著名写手)

[求助] 白鼠骨髓细胞培养的一个问题，棘手！

从四周雌性白鼠胫骨中取得细胞，培养6天后显微镜下观察饱和度为70-80%，大部分贴壁完好，有少量圆形、悬浮细胞。更换培养培养液时，先用PBS冲洗2次然后加入新鲜培养液，重新放到显微镜下观察时发现：90%的细胞变成圆形，而且几乎从培养皿底部脱离，而且细胞数目比换培养液前少了很多。
这时什么原因呢？
本打算明天接种细胞到试样上，看来不行了！
有类似经历的虫友吗？
可以保证PBS和培养液没有问题。
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1楼 2011-07-04 13:57:07
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westlover

银虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by 黄昏过客 at 2011-07-04 17:04:59:
如果那样的话，个人觉得那应该是细胞的问题，细胞贴壁效果不好。

是吗？可是别人从骨髓细胞里得出的贴壁细胞贴壁很好啊，换培养液的时候并不会从培养皿底部脱离。还能测试3小时附着率，3小时细胞形态等等，如果我的细胞贴壁不好，3小时后就算在试样表面铺展的很好，也会被PBS冲洗掉的吧？那就太郁闷了！今天是培养的第七天，应该接种了，也不知道是不是好些了。
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7楼2011-07-05 08:51:56
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黄昏过客

金虫 (正式写手)
★
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2011-07-05 11:05:20
培养到六天才换液的？估计是分泌物过多，细胞贴壁不是很好吧，一洗就下来了，猜测哈，小虾米期待大侠的解答
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从小与世抗争，无奈轮回难过
2楼2011-07-04 15:12:43
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westlover

银虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by 黄昏过客 at 2011-07-04 15:12:43:
培养到六天才换液的？估计是分泌物过多，细胞贴壁不是很好吧，一洗就下来了，猜测哈，小虾米期待大侠的解答

sorry，忘了说了，3天的时候也换过一次，当时也是细胞都浮起来了。
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3楼2011-07-04 16:36:12
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黄昏过客

金虫 (正式写手)
★
lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2011-07-05 11:05:40
引用回帖:
Originally posted by westlover at 2011-07-04 16:36:12:
sorry，忘了说了，3天的时候也换过一次，当时也是细胞都浮起来了。

如果那样的话，个人觉得那应该是细胞的问题，细胞贴壁效果不好。
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从小与世抗争，无奈轮回难过
4楼2011-07-04 17:04:59
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