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westlover

银虫 (著名写手)

[求助] 白鼠骨髓细胞培养的一个问题,棘手!

从四周雌性白鼠胫骨中取得细胞,培养6天后显微镜下观察饱和度为70-80%,大部分贴壁完好,有少量圆形、悬浮细胞。更换培养培养液时,先用PBS冲洗2次然后加入新鲜培养液,重新放到显微镜下观察时发现:90%的细胞变成圆形,而且几乎从培养皿底部脱离,而且细胞数目比换培养液前少了很多。
这时什么原因呢?
本打算明天接种细胞到试样上,看来不行了!
有类似经历的虫友吗?
可以保证PBS和培养液没有问题。
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westlover

银虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by 黄昏过客 at 2011-07-04 17:04:59:
如果那样的话,个人觉得那应该是细胞的问题,细胞贴壁效果不好。

是吗?可是别人从骨髓细胞里得出的贴壁细胞贴壁很好啊,换培养液的时候并不会从培养皿底部脱离。还能测试3小时附着率,3小时细胞形态等等,如果我的细胞贴壁不好,3小时后就算在试样表面铺展的很好,也会被PBS冲洗掉的吧?那就太郁闷了!今天是培养的第七天,应该接种了,也不知道是不是好些了。
7楼2011-07-05 08:51:56
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黄昏过客

金虫 (正式写手)


lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2011-07-05 11:05:20
培养到六天才换液的?估计是分泌物过多,细胞贴壁不是很好吧,一洗就下来了,猜测哈,小虾米期待大侠的解答
从小与世抗争,无奈轮回难过
2楼2011-07-04 15:12:43
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westlover

银虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by 黄昏过客 at 2011-07-04 15:12:43:
培养到六天才换液的?估计是分泌物过多,细胞贴壁不是很好吧,一洗就下来了,猜测哈,小虾米期待大侠的解答

sorry,忘了说了,3天的时候也换过一次,当时也是细胞都浮起来了。
3楼2011-07-04 16:36:12
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黄昏过客

金虫 (正式写手)


lixiangde(金币+1): 感谢回帖交流 2011-07-05 11:05:40
引用回帖:
Originally posted by westlover at 2011-07-04 16:36:12:
sorry,忘了说了,3天的时候也换过一次,当时也是细胞都浮起来了。

如果那样的话,个人觉得那应该是细胞的问题,细胞贴壁效果不好。
从小与世抗争,无奈轮回难过
4楼2011-07-04 17:04:59
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