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细胞培养中的问题
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fanny9900108
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细胞培养中的问题
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请教高手,为什么我养的HEp G2老是生长的很慢,而且死细胞很多,一般传代后的新的培养瓶特别不容易长起来,上面培养液上老是飘着许多死细胞!!!!
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stayhungry,stayfoolish
1楼
2012-03-20 17:13:01
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采妮830
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专业: 生物化学
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
G2细胞以及L2细胞,总的来说是非常好养的。状态好就算5%的FBS养都会张的。养不好又肯能冻存前就有问题。若是没有污染的话,传代的时候注意要用胰酶充分消化后再吹打下来,这样就避免机械损伤。而且据我的经验,吹得时候气泡多也是造成传代后漂浮细胞多的一个原因,所以尽量避免。希望对你有帮助,以后有问题多多交流~
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10楼
2012-03-21 20:27:57
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孙启亮
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专业: 前寒武纪地质学
【答案】应助回帖
★ ★
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amisking: 金币+2, 鼓励帮助解答问题!
2012-03-20 18:06:24
第一,血清是不是加足了,可以增加血清比例。第二,是不是有污染呢,这就需要楼主仔细对比下正常的细胞和自己养的细胞的形态了。查看细胞之间会不会有黑点、碎片,最后可以怀疑下是不是支原体污染。总能找到原因的
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2楼
2012-03-20 18:00:16
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zhouli_1991
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性别: GG
专业: 肿瘤化学药物治疗
【答案】应助回帖
★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助
2012-03-21 08:05:24
楼主先查一下你这个细胞是不是本身就长的很慢,如果不是可能就是你自己不操纵不认真,导致污染,或者就是你的培养液 PBS有问题,多查查这方面的资料,细胞是用心培养的 这个不能懒 状态不好就要天天换液 祝楼主培养出好细胞!
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3楼
2012-03-20 19:21:33
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fanny9900108
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专业: 化学生物学与生物有机化学
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2楼
:
Originally posted by
孙启亮
at 2012-03-20 18:00:16:
第一,血清是不是加足了,可以增加血清比例。第二,是不是有污染呢,这就需要楼主仔细对比下正常的细胞和自己养的细胞的形态了。查看细胞之间会不会有黑点、碎片,最后可以怀疑下是不是支原体污染。总能找到原因的
谢谢~·
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stayhungry,stayfoolish
4楼
2012-03-21 08:36:23
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