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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 质粒构建成功,也已经成功表达,但没有酶活,为什么？
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lican0826

金虫 (小有名气)

微生物

[求助] 质粒构建成功,也已经成功表达,但没有酶活,为什么？ 已有7人参与

一种酶的异源表达，质粒构建成功，筛选成功，表达也成功，但最后测酶活就是没有酶活，很郁闷，不知道为什么，望多指教，谢谢~~！！
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没有做不到，只有想不到！
1楼 2014-07-05 16:13:18
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enzyming

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
什么酶？你给的前提条件太少

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2楼2014-07-05 17:04:40
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dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
没有也很正常，底物不对，反应条件不对
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3楼2014-07-06 00:03:27
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轻风CYg

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你是把酶提取出来测酶活，还是在体内测的酶活？体外可能是提取过程中酶失活导致。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2014-07-06 07:31:20
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wbb75

铜虫 (初入文坛)
形成了包涵体吧

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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5楼2014-07-06 09:02:58
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ll9999

专家顾问 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
mRNA的表达本来就与各种影响因素有关嘛
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6楼2014-07-06 09:13:46
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jjwhl

银虫 (正式写手)
楼主，最近有没有测到酶活了？表达量有提高吗
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7楼2015-03-31 14:29:07
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jimjohntall

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

用什么载体表达的啊？酵母还是大肠还是枯草。。。这些情况都不一样的
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8楼2015-04-06 21:11:30
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199006287956

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

首先确定表达载体中，是胞内酶，还是胞外酶。胞内酶的话，需要破胞，也有可能形成了包涵体奥。

[ 发自小木虫客户端 ]
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追求不惜，奋斗不息
9楼2015-04-07 11:59:26
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sunim123

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
10楼2015-05-06 11:23:37
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