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chxiaorou

新虫 (初入文坛)

[求助] 急急急,基因组PCR扩增,结果无目的条带,求助!!! 已有3人参与

最近扩一个片段长度为550bp的基因,老是扩增不出来,要么就是出现了一个400bp左右的条带,并且测序结果显示这个400bp的不是目的基因,求高手指教!!
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hou88com

金虫 (小有名气)

为人低调

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-06-25 20:22:58
保证模板完整的前提下,完善优化引物
Timelysnowfortellsabumperharvest.
3楼2014-06-25 17:07:39
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愚者517

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-06-25 20:23:06
因组PCR扩增,其片段长度为550 bp,您没有扩出来,说明你设计的引物不行,需要从新设计引物。
2楼2014-06-25 14:41:32
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zlms_123

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-06-25 20:22:51
chxiaorou: 金币+2, 有帮助 2014-06-26 17:05:17
目的片段很短却扩增不出,最先应该检查下引物是否特异,会不会自身互补配对。祝你好运!
追求
4楼2014-06-25 17:30:27
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chxiaorou

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zlms_123 at 2014-06-25 17:30:27
目的片段很短却扩增不出,最先应该检查下引物是否特异,会不会自身互补配对。祝你好运!

怎么样检查引物特异性啊,我是新手,不太清楚
5楼2014-06-26 17:06:55
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