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NI 柱纯化重组蛋白无法洗脱是什么原因？ 已有4人参与
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最近一直在做重组蛋白的纯化，8M盐酸胍（PBS稀释）变性，室温平衡40min,与NI柱结合1h ,灌柱，复性，梯度洗脱 ，但跑不出想要的峰值，接收不到纯化的蛋白，后续又对盐酸胍变性液和NI柱WB检测，发现我的目的蛋白主要都在NI柱子上，而且出现重组聚集状态，在这里求助高手，如何解决蛋白结合ni柱，无法洗脱的问题，再有，蛋白聚集的原因是什么，如何解决，蛋白聚集是否是无洗脱的原因？谢谢啦 |
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9楼2014-06-11 12:31:11
lpzl
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4楼2014-06-10 15:51:03