| 查看: 2496 | 回复: 15 | ||
aofeng860308木虫 (正式写手)
|
[求助]
纯化时蛋白一上柱就絮凝
|
|
|
恼死了，用大肠杆菌表达系统表达了一蛋白，可溶，在上清中。可是纯化时，将蛋白一加到Ni2+柱中，马上就絮凝了，与填料一起结合成团状的东西。 起初蛋白浓度挺高，在4℃下和-20℃下过夜都会絮凝起来，后来将蛋白溶液稀释了5-8倍，保存时不会出现絮凝了，可是一上柱又出现了絮凝，真是搞不懂了！ 请大侠们给我分析分析，究竟怎么回事？能不能再给我提点建议什么的，谢谢啦！ |
回复此楼» 猜你喜欢
氢氧化钾活化操作
已经有19人回复
-
散金
已经有68人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有278人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
-
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
-
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点
已经有0人回复
-
ADC标杆分子T-DM1全解析：从结构设计到实验室应用的技术要点
已经有0人回复
-
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？
已经有0人回复
-
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
-
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
-
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 蛋白质的Ni柱纯化问题
已经有23人回复
- 蛋白纯化时目的蛋白没有洗脱下来
已经有14人回复
- 镍柱蛋白纯化，求好心人讲解。
已经有4人回复
- 关于蛋白质纯化柱子的问题
已经有9人回复
- His标签的蛋白纯化柱子
已经有10人回复
- 今天你纯化蛋白了吗？跪求柱子挂不好的原因。。。。
已经有15人回复
- 关于镍柱纯化蛋白
已经有10人回复
- GST柱纯化蛋白 是否变性
已经有6人回复
- 如何在蛋白纯化后去除6组氨酸(6His)标签
已经有17人回复
- 蛋白纯化遇到问题
已经有22人回复
- 蛋白质纯化凝胶层析
已经有9人回复
- FPLC蛋白纯化堵柱子？
已经有24人回复
- his标签蛋白纯化，不挂柱
已经有18人回复
- 蛋白纯化怎么去除核酸
已经有14人回复
- 镍柱纯化蛋白透析出现大量沉淀，请教
已经有18人回复
- 【求助/交流】为什么镍柱纯化可溶性蛋白，电泳结果总是显示不纯呢？
已经有9人回复
- 【求助/交流】镍柱纯化的蛋白保存在-20度一个星期，拿出来都是沉淀？？
已经有19人回复
- 【分享】蛋白质纯化个人总结2
已经有38人回复
- 基因带六个his标签，蛋白纯化时为何挂不上镍柱
已经有26人回复
【答案】应助回帖
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
aofeng860308(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-24 03:14:48
aofeng860308: 金币+1, ★有帮助, OK，Let me try，Thank you。 2013-05-24 10:25:18
感谢参与，应助指数 +1
aofeng860308(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-05-24 03:14:48
aofeng860308: 金币+1, ★有帮助, OK，Let me try，Thank you。 2013-05-24 10:25:18
| try to add more NaCl salt into the buffer, load less sample to the column. Furthermore, adjust your PH to see if under different PH can maximize the protein's dissolvability. |
2楼2013-05-24 00:30:51
3楼2013-05-24 08:22:45
aofeng860308
木虫 (正式写手)
- 应助: 53 (初中生)
- 金币: 3661.4
- 散金: 145
- 红花: 5
- 帖子: 497
- 在线: 531.1小时
- 虫号: 938003
- 注册: 2010-01-06
- 性别: GG
- 专业: 环境分析化学
4楼2013-05-24 10:18:36
whb21
木虫 (著名写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 105 (高中生)
- 金币: 9711.3
- 散金: 625
- 红花: 7
- 帖子: 2994
- 在线: 172.4小时
- 虫号: 928584
- 注册: 2009-12-15
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
5楼2013-05-24 10:28:10
6楼2013-05-24 10:36:37
mitocam
新虫 (正式写手)
- 应助: 46 (小学生)
- 金币: 1114.5
- 散金: 93
- 红花: 2
- 帖子: 728
- 在线: 152.1小时
- 虫号: 1899939
- 注册: 2012-07-19
- 专业: 细胞呼吸与代谢
9楼2013-05-24 11:02:05
whb21
木虫 (著名写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 105 (高中生)
- 金币: 9711.3
- 散金: 625
- 红花: 7
- 帖子: 2994
- 在线: 172.4小时
- 虫号: 928584
- 注册: 2009-12-15
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
10楼2013-05-24 11:03:14
aofeng860308
木虫 (正式写手)
- 应助: 53 (初中生)
- 金币: 3661.4
- 散金: 145
- 红花: 5
- 帖子: 497
- 在线: 531.1小时
- 虫号: 938003
- 注册: 2010-01-06
- 性别: GG
- 专业: 环境分析化学
7楼2013-05-24 10:56:15
aofeng860308
木虫 (正式写手)
- 应助: 53 (初中生)
- 金币: 3661.4
- 散金: 145
- 红花: 5
- 帖子: 497
- 在线: 531.1小时
- 虫号: 938003
- 注册: 2010-01-06
- 性别: GG
- 专业: 环境分析化学
8楼2013-05-24 10:56:57
