| 查看: 2303 | 回复: 15 | |||
[求助]
今天你纯化蛋白了吗？跪求柱子挂不好的原因。。。。 已有1人参与
|
|
最近纯化蛋白，各种柱子搞得晚上睡觉都在过柱子。。。。做过纯化的童鞋，你们懂的。。。。。。 但是最近结果总不理想，我将样品脱盐后过Hitrap Q FF柱，穿透（前两个收集管中）中有时会有酶活，然后在第7、8、9管（盐浓度是14%左右）中我的蛋白就洗下来了，这种状况让我真的有点无能为力了。都不知道是何原因，该如何改进，我升高过pH，也挂不住。 我的缓冲液：20mM tris-hcl， 2MNacl+20mMtris-hcl. 希望各位纯化专家能给我解答一下，谢谢。。。。 |
回复此楼» 猜你喜欢
垃圾破二本职称评审标准
已经有19人回复
-
职称评审没过，求安慰
已经有53人回复
-
毕业后当辅导员了，天天各种学生超烦
已经有5人回复
-
26申博自荐
已经有3人回复
-
A期刊撤稿
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 重组蛋白含半胱氨酸纯化过程如何保护巯基
已经有14人回复
- FPLC蛋白纯化堵柱子？
已经有24人回复
- his标签蛋白纯化，不挂柱
已经有18人回复
- 镍柱纯化蛋白透析出现大量沉淀，请教
已经有18人回复
- 【求助/交流】蛋白质纯化的疑难问题
已经有11人回复
- 【求助/交流】为什么镍柱纯化可溶性蛋白，电泳结果总是显示不纯呢？
已经有9人回复
- 【求助/交流】大家做蛋白纯化的都到什么型号柱子，效果怎么样呢
已经有10人回复
- 【求助/交流】SP柱子纯化蛋白，蛋白结合后，用2M NacL都没有洗脱下来，该怎么办？
已经有5人回复
- 【求助/交流】大家做蛋白纯化时上柱子的缓冲MES需要过膜吗？有机系的还是水系的？
已经有3人回复
- 基因带六个his标签，蛋白纯化时为何挂不上镍柱
已经有26人回复
sunsicheng
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 803.2
- 散金: 305
- 红花: 3
- 帖子: 149
- 在线: 62.6小时
- 虫号: 1782740
- 注册: 2012-04-27
- 性别: GG
- 专业: 电路与系统
2楼2012-05-31 10:29:25
3楼2012-05-31 10:41:28
zxc6884
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 30 (小学生)
- 金币: 11805.1
- 散金: 25
- 红花: 2
- 帖子: 1103
- 在线: 151.6小时
- 虫号: 1043380
- 注册: 2010-06-18
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
4楼2012-06-01 19:10:50
5楼2012-06-01 19:30:55
zxc6884
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 30 (小学生)
- 金币: 11805.1
- 散金: 25
- 红花: 2
- 帖子: 1103
- 在线: 151.6小时
- 虫号: 1043380
- 注册: 2010-06-18
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
分子结构6楼2012-06-01 23:28:01
冼亮淀粉酶
专家顾问 (知名作家)
生物大分子降解酶
-
专家经验: +248 - MicEPI: 114
- 应助: 257 (大学生)
- 贵宾: 0.272
- 金币: 19284.6
- 散金: 1704
- 红花: 121
- 帖子: 6565
- 在线: 2766.2小时
- 虫号: 856414
- 注册: 2009-09-25
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
- 管辖: 微生物
7楼2012-06-02 00:13:13
mlanqiang
木虫之王 (文学泰斗)
蓝博士
- 应助: 3409 (副教授)
- 金币: 55278.8
- 散金: 5498
- 红花: 62
- 帖子: 73916
- 在线: 730.8小时
- 虫号: 302202
- 注册: 2006-12-02
- 性别: GG
- 专业: 胶体与界面化学
8楼2012-06-02 06:22:38
9楼2012-06-02 18:05:40
 |
10楼2012-06-02 18:05:48