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grape114

金虫 (正式写手)


[交流] NI柱上咪唑洗脱问题

Binding buffer 中含有20mmol咪唑,这个咪唑和NI结合吗?Elution 后如何去除咪唑,保留NI在柱上?把上面的咪唑再换成重组蛋白命运一样吗?
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grape114

金虫 (正式写手)


我想通了,关键一点咪唑和目的蛋白之间是竞争性洗脱,谁的竞争力强谁就和NI结合,不用管平衡液中低浓度咪唑和NI的结合,目的蛋白一上来都要让位。高浓度咪唑洗脱目的蛋白后,只需要用其他不含咪唑或者低浓度咪唑的buffer冲洗柱子,就可以降低柱上咪唑浓度,所以不用担心下次上样问题。
2楼2013-01-07 15:40:08
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dylanxue

金虫 (小有名气)


★ ★
grape114(金币+1): 谢谢参与
xiaoxiao270: 金币+1 2013-02-23 14:10:52
做亲和层析还是相对不难的,常做分离纯化啊?
3楼2013-02-23 13:06:15
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grape114

金虫 (正式写手)


引用回帖:
3楼: Originally posted by dylanxue at 2013-02-23 13:06:15
做亲和层析还是相对不难的,常做分离纯化啊?

还需要多多学习,刚入行
4楼2013-02-24 13:38:24
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dylanxue

金虫 (小有名气)


都是做这一行的,常交流啊
5楼2013-02-24 20:58:34
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