24小时热门版块排行榜    

查看: 1646  |  回复: 6

amazingjunny

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白纯化中Ni-NTA变紫色! 已有2人参与

纯化前用50mM Tris pH 8.5, 300mM NaCl, 4mM β-ME,30mM imidazole,Ni-NTA马上变成紫色,用相同成分但pH为7.4的buffer冲洗后紫色消失,所以应该不是还原剂的问题,填料的参数显示可在pH范围为3-12,很好奇是什么原因,求高人指点!多谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alarace

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1,蛋白是否带颜色;2,可能是2-ME浓度比较高
2楼2013-12-09 17:38:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

amazingjunny

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by alarace at 2013-12-09 17:38:20
1,蛋白是否带颜色;2,可能是2-ME浓度比较高

谢谢,蛋白没有颜色,纯化前平衡,并没有上样……变紫色后我用同样组分(β-ME)浓度相同,只是pH变成了7.4,柱子就恢复了,难道是在碱性条件下β-ME还原性更强么?
3楼2013-12-09 19:47:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuyuexinfei

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个是有点奇怪,楼主该检查一下试剂是否有问题,或者填料是不是正品
我选择,我喜欢;我喜欢我的选择。
4楼2013-12-11 20:49:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

amazingjunny

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by liuyuexinfei at 2013-12-11 20:49:56
这个是有点奇怪,楼主该检查一下试剂是否有问题,或者填料是不是正品

嗯,谢谢
5楼2013-12-12 09:47:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

花雨渡飞仙

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你用的谁家的填料啊?
6楼2013-12-18 13:59:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

amazingjunny

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 花雨渡飞仙 at 2013-12-18 13:59:12
你用的谁家的填料啊?

GE Ni sepherose fast flow
7楼2013-12-20 10:45:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 amazingjunny 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 303求调剂 +5 安忆灵 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:46 by 素颜倾城1988
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +7 梨花珞晚风 2026-03-17 7/350 2026-03-22 10:03 by 2026paper
[考研] 初试 317 +7 半拉月丙 2026-03-20 7/350 2026-03-21 22:26 by peike
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] 【考研调剂】化学专业 281分,一志愿四川大学,诚心求调剂 +11 吃吃吃才有意义 2026-03-19 11/550 2026-03-21 18:23 by 学员8dgXkO
[考研] 297求调剂 +11 戏精丹丹丹 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:47 by ColorlessPI
[考研] 070300化学319求调剂 +7 锦鲤0909 2026-03-17 7/350 2026-03-21 03:46 by JourneyLucky
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业(081702)315分求调剂 +12 yangfz 2026-03-17 12/600 2026-03-21 03:30 by JourneyLucky
[考研] 301求调剂 +10 yy要上岸呀 2026-03-17 10/500 2026-03-21 03:14 by JourneyLucky
[考研] 初始318分求调剂(有工作经验) +3 1911236844 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:33 by JourneyLucky
[考研] 332求调剂 +4 ydfyh 2026-03-17 4/200 2026-03-21 02:20 by JourneyLucky
[考研] 311求调剂 +5 冬十三 2026-03-18 5/250 2026-03-21 00:16 by JourneyLucky
[考研] 一志愿苏州大学材料求调剂,总分315(英一) +5 sbdksD 2026-03-19 5/250 2026-03-20 22:10 by luoyongfeng
[考研] 350求调剂 +5 weudhdk 2026-03-19 5/250 2026-03-20 22:04 by luoyongfeng
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
[考研] 一志愿 南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕 +5 @taotao 2026-03-20 5/250 2026-03-20 20:16 by JourneyLucky
[考研] 一志愿福大288有机化学,求调剂 +3 小木虫200408204 2026-03-18 3/150 2026-03-19 13:31 by houyaoxu
[考研] 本科郑州大学物理学院,一志愿华科070200学硕,346求调剂 +4 我不是一根葱 2026-03-18 4/200 2026-03-19 09:11 by 浮云166
[考研] 085601专硕,总分342求调剂,地区不限 +5 share_joy 2026-03-16 5/250 2026-03-18 14:48 by haxia
[考研] 302求调剂 +4 小贾同学123 2026-03-15 8/400 2026-03-17 10:33 by 小贾同学123
信息提示
请填处理意见