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旭旭大将军

银虫 (小有名气)

[求助] 关于连接转化的问题 已有6人参与

最近在做连接转化,目的是测序,目的基因长度在2000bp左右,用的连接试剂盒是天根,蓝白斑筛选后做PCR还是没有条带,已经做了很多次了,最近两次转化的板子上居然蓝斑白斑均没有,是空白的          有两个问题:1、基因一直连不上的原因是什么      2、这两次板子上什么都没长的原因是什么

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旭旭大将军

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-06-09 00:13:04
你要交代下你用的什么酶做PCR,连接体系之类的细节,我们才能帮到你

PCR用的是老师带回来的takara的PCRmix ,不清楚是否带A,明天查一下。   胶回收浓度是50    链接是   T :1     DNA : 4    水2   T4:1   buffer:1
3楼2014-06-09 00:37:11
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