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dsjyd

金虫 (著名写手)

[求助] 反转录RNA时出现基因组DNA的原因有哪些? 已有6人参与

问题如题目的,老师只说提取不彻底的,可是那些方面会造成提取不彻底呢?老师当时解释的也不是很理解的,希望有智者可以帮忙解答一下的,谢了

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OmicsLink

银虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by dsjyd at 2014-05-17 23:19:06
我们根据老师给的实验步骤做的,好像没有加Dnase,进行电泳时出现了基因组DNA,问老师原因也没说出所以然来,只说提取不完全,可是在操作步骤上有哪些方面会造成呢?
...

不经过Dnase I消化的话肯定就会有gDNA残留。得先确保你们用的试剂里是否包含这个成分。操作步骤上,进行DNase I 消化后,是直接进行反转录或是再重新纯化就要仔细阅读说明书。并且,要确保试剂没有被污染。推荐All-in-One™ First-Strand cDNA Synthesis Kit.
一切有为法,如露如闪电
7楼2014-05-19 11:18:08
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dsjyd

金虫 (著名写手)

忘说了,是cDNA在琼脂凝胶电泳时出现了基因组DNA

[ 发自小木虫客户端 ]
在最好的年华里,不要辜负最美的自己
2楼2014-05-15 23:57:14
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难得糊涂gtt

新虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-05-16 11:45:12
提取RNA时应该加入Dnase I在37度消化DNA
3楼2014-05-16 08:52:21
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dsjyd

金虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 难得糊涂gtt at 2014-05-16 08:52:21
提取RNA时应该加入Dnase I在37度消化DNA

我们根据老师给的实验步骤做的,好像没有加Dnase,进行电泳时出现了基因组DNA,问老师原因也没说出所以然来,只说提取不完全,可是在操作步骤上有哪些方面会造成呢?

[ 发自小木虫客户端 ]
在最好的年华里,不要辜负最美的自己
4楼2014-05-17 23:19:06
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