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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 为什么PCR之后的电泳会出现这样的条带？图片不太清楚，左边三条是内参
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冰糖-葫芦娃

铁虫 (初入文坛)

[求助] 为什么PCR之后的电泳会出现这样的条带？图片不太清楚，左边三条是内参已有4人参与

片段长693bp,去年年底P这段基因还好好的~内参出来了，说明cDNA没问题啊

为什么PCR之后的电泳会出现这样的条带？图片不太清楚，左边三条是内参
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1楼2014-05-06 16:49:19
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冰糖-葫芦娃

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-05-06 17:45:36
降低退火温度试试，另外可以增加循环的次数。不过，P不出来可能跟设计的引物也有一点关系

重新设计引物么？我用的是梯度PCR，设置的是56.0度，56.3度和56.7度
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3楼2014-05-07 11:46:17
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-05-07 18:28:50
冰糖-葫芦娃: 金币+2, ★有帮助 2014-05-27 13:20:06
降低退火温度试试，另外可以增加循环的次数。不过，P不出来可能跟设计的引物也有一点关系
赞一下 回复此楼
植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
2楼2014-05-06 17:45:36
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 冰糖-葫芦娃 at 2014-05-07 11:46:17
重新设计引物么？我用的是梯度PCR，设置的是56.0度，56.3度和56.7度...

如果降低温度和增加循环次数还做不出来的话可以考虑更换引物
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植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
4楼2014-05-07 13:12:18
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
单链cDNA也是容易降解的，样品保存不好就不行了
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5楼2014-05-08 09:31:30
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