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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » PCR产物图 请问是不是DNA模板被污染了？
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chensuya

新虫 (小有名气)

[求助] PCR产物图 请问是不是DNA模板被污染了？ 已有5人参与

学弟做的PCR产物电泳图（没有加marker），怎么改进呢？

PCR产物图 请问是不是DNA模板被污染了？
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当你真心想做一件事，全世界都会联合起来帮助你
1楼 2014-05-02 10:52:05
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chensuya

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cx13033236 at 2014-05-03 10:22:50
不加maker就不知道P的结果是不是你要的目标片段啊，说什么条件改变都没用。

为了节省，先看看有没有扩增出来，，，
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7楼2014-05-04 11:43:43
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chensuya

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by wubingqi at 2014-05-04 08:45:39
1.模版用量过高
2.电泳时电压过大

2微升，我们一直都用的是90mA，120V。。。。。。
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8楼2014-05-04 11:45:58
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chensuya

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 熬夜上网 at 2014-05-04 08:42:40
用基因组放模板p的？

乳酸菌DNA，貌似学弟的DNA没有提取好，量特别少
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9楼2014-05-04 11:48:21
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chensuya

新虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 熬夜上网 at 2014-05-04 12:05:07
基因组的话我倒是遇到过类似情况，非特异性扩增的小片段比较多，造成了整个泳道几乎都是亮的情况。
...

那你后来怎么优化条件的呢？有没有P出来？
还有想问下，PCR扩增后的产物要拿去测序，扩增出来后要做什么处理？没找到相关的操作资料。。。新手求助。。。
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11楼2014-05-04 12:13:19
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chensuya

新虫 (小有名气)
已经53度了，做出来效果差不多

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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13楼2014-05-04 12:25:10
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chensuya

新虫 (小有名气)
嗯嗯，试试！！！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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15楼2014-05-04 12:34:58
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chensuya

新虫 (小有名气)
送红花一朵
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17楼: Originally posted by lp198201 at 2014-05-04 21:36:49
减少扩增循环数，降低电压至80V，跑的太丑了，我老板看到这个结果就得给我把胶扔了，另外你的电泳槽尺子厚度太厚，有条件的话可以换成0.5mm厚度，非常漂亮。

扔了。。。真是中国好老板啊！菜鸟一只，受教了！谢谢！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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18楼2014-05-04 23:11:50
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