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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 关于单细菌菌落测试测序不出来的问题
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pigpig-877

铜虫 (初入文坛)

[求助] 关于单细菌菌落测试测序不出来的问题 已有3人参与

分离纯化的单细菌菌落，送去测序，提取的DNA和PCR后的产物都有条带，但是测序发现序列太短，只有1300，甚至测不出来，什么原因？谢谢各位大侠拔刀帮助哇
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1楼 2014-03-22 23:06:09
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pigpig-877

铜虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by 雷杨琴 at 2014-03-23 11:11:38
以前也遇到测不出来的问题，PCR条带很亮，但测序公司始终说浓度太低，无法回收，试了好几次都这样。后面自己胶回收4管混在一起后再送去测序，结果还真测出来了。建议楼主尝试一下。

PCR条带确实很亮，那我试试，谢谢小雷同志
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9楼2014-03-25 23:41:31
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dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引物的问题？ 27F，1492R?还是M13克隆测序
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2楼2014-03-22 23:14:39
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pigpig-877

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dllchina at 2014-03-22 23:14:39
引物的问题？ 27F，1492R?还是M13克隆测序

7F , 1540R,序列测出来大概只有1300，甚至测不出来
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3楼2014-03-22 23:41:36
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dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by pigpig-877 at 2014-03-22 23:41:36
7F , 1540R,序列测出来大概只有1300，甚至测不出来...

你引物错了吧，你是测的克隆序列还是测通啊

[ 发自小木虫客户端 ]
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4楼2014-03-23 00:24:40
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