24小时热门版块排行榜    

查看: 2360  |  回复: 9

pigpig-877

铜虫 (初入文坛)

[求助] 关于单细菌菌落测试测序不出来的问题 已有3人参与

分离纯化的单细菌菌落,送去测序,提取的DNA和PCR后的产物都有条带,但是测序发现序列太短,只有1300,甚至测不出来,什么原因?谢谢各位大侠拔刀帮助哇
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引物的问题? 27F,1492R?还是M13克隆测序
2楼2014-03-22 23:14:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pigpig-877

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by dllchina at 2014-03-22 23:14:39
引物的问题? 27F,1492R?还是M13克隆测序

7F , 1540R,序列测出来大概只有1300,甚至测不出来
3楼2014-03-22 23:41:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by pigpig-877 at 2014-03-22 23:41:36
7F , 1540R,序列测出来大概只有1300,甚至测不出来...

你引物错了吧,你是测的克隆序列还是测通啊

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-03-23 00:24:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by dllchina at 2014-03-23 00:24:40
你引物错了吧,你是测的克隆序列还是测通啊
...

你是测根瘤放线菌吧,也可以用通用细菌引物来测,啥公司,说测不出来,浓度太低?信息给全点

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2014-03-23 00:29:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rv1nm2y

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
会不会是假阳性啊,所以才没测出来。。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

6楼2014-03-23 10:07:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雷杨琴

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
pigpig-877: 金币+20, 才赢浓缩试试 2014-03-25 23:43:24
以前也遇到测不出来的问题,PCR条带很亮,但测序公司始终说浓度太低,无法回收,试了好几次都这样。后面自己胶回收4管混在一起后再送去测序,结果还真测出来了。建议楼主尝试一下。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

7楼2014-03-23 11:11:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pigpig-877

铜虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by rv1nm2y at 2014-03-23 10:07:25
会不会是假阳性啊,所以才没测出来。。

没有做克隆,不存在假阳性的说法吧
8楼2014-03-25 23:40:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pigpig-877

铜虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by 雷杨琴 at 2014-03-23 11:11:38
以前也遇到测不出来的问题,PCR条带很亮,但测序公司始终说浓度太低,无法回收,试了好几次都这样。后面自己胶回收4管混在一起后再送去测序,结果还真测出来了。建议楼主尝试一下。

PCR条带确实很亮,那我试试,谢谢小雷同志
9楼2014-03-25 23:41:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pigpig-877

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by dllchina at 2014-03-23 00:24:40
你引物错了吧,你是测的克隆序列还是测通啊
...

引物没有错,测通,细菌的通用引物,谢谢版主
10楼2014-03-25 23:42:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 pigpig-877 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +11 kulium 2026-08-21 14/700 2026-08-24 02:12 by 流流伤
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +4 炎黄贵胄 2026-08-22 5/250 2026-08-24 02:09 by 流流伤
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +16 羊腰板 2026-08-21 17/850 2026-08-23 23:02 by tianxiaochun
[基金申请] 让我中一个面上吧! +12 大萍1987 2026-08-20 15/750 2026-08-23 20:44 by 大萍1987
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见