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16SrDNA测序问题
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shellyxss
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16SrDNA测序问题
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细菌的16SrDNA用通用引物PCR出来后第二天就送样拿去测序,结果是测序失败,可能是什么原因呢?
PCR结束后做了电泳,结果显示在1500bp处有条带
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2014-03-17 14:31:21
1500要么walking测通,要么双向测通。
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2014-03-17 09:42:20
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Originally posted by
yipan
at 2014-03-17 09:42:20
1500要么walking测通,要么双向测通。
我选择的是双向测通
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3楼
2014-03-17 09:43:54
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2014-03-17 10:25:01
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shellyxss
at 2014-03-17 09:43:54
我选择的是双向测通...
16srDNA鉴定的话最好是连接到T载上面去测,PCR产物一般测不出来,做个蓝白斑看看。
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4楼
2014-03-17 09:50:12
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yipan
at 2014-03-17 09:50:12
16srDNA鉴定的话最好是连接到T载上面去测,PCR产物一般测不出来,做个蓝白斑看看。...
我就是想做个普通的菌种鉴定,有些测序成功,有些测序失败
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2014-03-17 10:04:58
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shellyxss
at 2014-03-17 10:04:58
我就是想做个普通的菌种鉴定,有些测序成功,有些测序失败...
是不是染菌了?污染的话有可能做不出的
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2014-03-17 10:29:43
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重做就是了,再不行的话就做克隆吧,我也做了很多这个
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yipan
at 2014-03-17 10:29:43
是不是染菌了?污染的话有可能做不出的...
谢谢了
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2014-03-17 14:30:46
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at 2014-03-17 12:51:15
重做就是了,再不行的话就做克隆吧,我也做了很多这个
已经重新做过了 还是这样
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2014-03-17 14:31:05
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shellyxss
at 2014-03-17 14:31:05
已经重新做过了 还是这样...
那就做克隆吧,转入大肠杆菌拿菌液去测序,试试吧,我刚还做了一个
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2014-03-18 10:54:55
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