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shanyaodan铜虫 (初入文坛)
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[交流]
探讨酵母转化子PCR验证方法
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| 本人目前在做酵母转化（质粒为游离型的），发现涂布平板后长出来的转化子重新挑单菌落划线培养。等培养一天左右长出来的菌体直接进行PCR验证，能够扩增出目的条带，但继续培养2天以上，再直接用菌体PCR验证，很难扩增出目的条带。请各位朋友探讨一下，是不是因为短时间内长出来的酵母比较新鲜，细胞壁较薄，也就是说还没有长老，在PCR时容易破壁释放出质粒；而随着培养时间加长，细胞壁变厚导致PC时扩增不出目的条带？ |
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