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shanyaodan铜虫 (初入文坛)
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探讨酵母转化子PCR验证方法
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| 本人目前在做酵母转化(质粒为游离型的),发现涂布平板后长出来的转化子重新挑单菌落划线培养。等培养一天左右长出来的菌体直接进行PCR验证,能够扩增出目的条带,但继续培养2天以上,再直接用菌体PCR验证,很难扩增出目的条带。请各位朋友探讨一下,是不是因为短时间内长出来的酵母比较新鲜,细胞壁较薄,也就是说还没有长老,在PCR时容易破壁释放出质粒;而随着培养时间加长,细胞壁变厚导致PC时扩增不出目的条带? |
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