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铁虫 (小有名气)

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[求助] 以质粒为模板做pcr时要不要稀释？已有4人参与

我新设计的引物在5端突变了几个碱基，以前的引物以质粒为模板扩增不出来，而以双酶切产物的话就能扩增出来，现在新设计的引物下游引物不变，上游引物突变了几个碱基，以质粒和双酶切产物为模版都扩增不出来呢，这是为什么？是不是以质粒为模板时一般要进行稀释，要比pcr双酶切产物浓度低才可以？

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1楼 2014-01-10 08:55:28

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heihei2866

铁虫 (正式写手)

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gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2014-01-11 23:37:19

我们一般都稀释100倍左右再做模板

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