| 查看: 2781 | 回复: 24 | |||
bigboy123铜虫 (小有名气)
|
[交流]
【分享】看看我做的这个新型PCR增强剂效果怎么样 已有16人参与
|
||
|
这个是我偶然发现的一种物质，可以有效提高PCR扩增的产量，翻变所有文献都没有该物质的介绍，因此对国产和进口的Taq酶还比较有效。产品质量可以稳定了，正准备请人公开测试。 挂个产品介绍和刚收到的一个电泳图谱（朋友帮忙做的）在里面，愿意帮我做测试并给我发图片的朋友可以联系我，bsyan_cn@sina.com.cn,发短信也可以。  这个图是朋友帮忙做的电泳图，从左到右1-4是加入增强剂的，5-6是未加的。其他都是无关条带。 |
回复此楼» 猜你喜欢
081700，311，求调剂
已经有15人回复
-
一志愿北京化工085600 310分求调剂
已经有18人回复
-
085600材料与化工301分求调剂院校
已经有4人回复
-
材料与化工371求调剂
已经有14人回复
-
336材料与化工085600求调剂
已经有7人回复
-
材料334求调剂
已经有18人回复
-
331求调剂
已经有8人回复
-
332求调剂
已经有17人回复
-
一志愿南京航空航天大学 材料与化工329分求调剂
已经有4人回复
-
材料专硕322
已经有7人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助：约6kb质粒做模板的pcr程序怎么设定啊
已经有12人回复
- 做pcr时pcr管子变形严重是怎么回事？
已经有21人回复
- 除了利用同源性做PCR外，如何定向筛选一个基因？
已经有4人回复
- 细菌引物 338F 518R 做DGGE之后 pcr
已经有9人回复
- 请高手看看我的PCR图片
已经有28人回复
- 做了几次PCR CT值都有变化怎么办？谢谢大家！！
已经有3人回复
- 做过overlap PCR的虫子过来看看
已经有19人回复
- 做过用同源重组进行基因敲出的朋友请进，PCR做不出来！！
已经有16人回复
- 请教各位前辈 为什么我做菌落PCR总也P不出来
已经有28人回复
- 看看我的DNA提取及PCR结果有什么问题
已经有11人回复
- 最近在做PCR，同样的体系，同样的模板，引物1能扩出来。引物2、3做不出来，去原因
已经有6人回复
- 易错PCR效果
已经有7人回复
- 【求助/交流】做realtime-PCR，退火温度很重要吗？
已经有15人回复
- 【求助/交流】连接产物，是否可以直接做PCR模板？
已经有17人回复
- 【求助】请教各位有谁做过pcr-SSCP，他和PCR-DGGE哪个用于确定优势菌更有效果？
已经有3人回复
bigboy123
铜虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 149.8
- 散金: 7
- 帖子: 84
- 在线: 13.3小时
- 虫号: 381419
- 注册: 2007-05-24
- 专业: 生物大分子结构与功能
★ ★ ★
silicare(金币+3):效果很好啊，分享一下吧 2010-09-19 12:25:58
silicare(金币+3):效果很好啊，分享一下吧 2010-09-19 12:25:58
 费了半天劲，终于传上来了。不过这个有点夸张，一般人做不到这个程度。我做这个对比试验时，用的是国产最普通最便宜的Taq酶，现在大家用的Taq酶都比我用的质量和价格都高了很多倍，所以不同质量的酶之间应该存在差异。 多次试验的总体感觉，PCR增强剂不会改变强样本的Ct值和荧光信号最大强度，弱样本的Ct值也不会改变，但能提高信号强度。原先信号太低的样本就会超过阈值线而被检出了，这样可以提高试剂的灵敏度。 另外强调一下，荧光PCR反应的好坏最终取决于所设计的引物和探针的质量，增强剂只是在你实在没办法再改进时，帮你通过提高PCR产物产量，再前进一步而已。毕竟尝试改变引物和探针可能对PCR效率的提高更加明显，只是需要些运气而已。 |
7楼2010-09-09 19:04:11
bigboy123
铜虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 149.8
- 散金: 7
- 帖子: 84
- 在线: 13.3小时
- 虫号: 381419
- 注册: 2007-05-24
- 专业: 生物大分子结构与功能
18楼2010-09-28 11:17:12
bigboy123
铜虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 149.8
- 散金: 7
- 帖子: 84
- 在线: 13.3小时
- 虫号: 381419
- 注册: 2007-05-24
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2010-09-09 11:04:13
3楼2010-09-09 12:09:38
yujiaping1
木虫 (著名写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1365.2
- 散金: 10
- 红花: 5
- 帖子: 1174
- 在线: 66.6小时
- 虫号: 929883
- 注册: 2009-12-17
- 性别: MM
- 专业: 疫苗学
4楼2010-09-09 12:22:34
三磷酸腺苷
铁杆木虫 (职业作家)
- BioEPI: 3
- 应助: 1 (幼儿园)
- 贵宾: 0.021
- 金币: 7298.5
- 散金: 9
- 红花: 13
- 帖子: 4032
- 在线: 224.7小时
- 虫号: 551611
- 注册: 2008-04-27
- 性别: GG
- 专业: 神经系统肿瘤（含特殊感受
5楼2010-09-09 12:32:33
bigboy123
铜虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 149.8
- 散金: 7
- 帖子: 84
- 在线: 13.3小时
- 虫号: 381419
- 注册: 2007-05-24
- 专业: 生物大分子结构与功能
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
scelab(金币+7):鼓励新虫！欢迎多来交流！:tiger06: 2010-09-09 23:02:24
scelab(金币+7):鼓励新虫！欢迎多来交流！:tiger06: 2010-09-09 23:02:24
|
实时荧光PCR定量依据是模板刚开始出现扩增时的循环数（Ct值）来进行定量，不是根据PCR终产物来定量的。 一般Taq酶在PCR循环后期聚合活性和特异性都会下降，从而导致有效的扩增效率下降，因此一般厂家都会添加一些乱七八糟的增强剂来延缓酶的衰竭，我这个由于是非文献的东西，其工作机理也从没有被报告过，对大家的Taq酶才适用。 在荧光PCR扩增中，这个增强剂可以提高低拷贝样本的荧光信号强度，可以与强样本的扩增信号强度相当，对Ct值没有改变，因此不会改变定量的准确性。 因此我们才推测对低拷贝样本的扩增更有效些。 电泳法检测的结果比较粗糙，主要是朋友随便拿个样本就给测了，还没有来得及做梯度的PCR扩增效果对比，过几天结果就会上传吧。 目前做过的试验有37度热稳定性，及反复冻融试验，只要试剂避光和避免反复开盖，基本比较稳定。如果还有什么需要测试的地方，欢迎提点建议，以及帮忙测试，我们将会万分感谢。 |
6楼2010-09-09 18:42:25
bigboy123
铜虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 149.8
- 散金: 7
- 帖子: 84
- 在线: 13.3小时
- 虫号: 381419
- 注册: 2007-05-24
- 专业: 生物大分子结构与功能
8楼2010-09-09 19:06:15
bigboy123
铜虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 149.8
- 散金: 7
- 帖子: 84
- 在线: 13.3小时
- 虫号: 381419
- 注册: 2007-05-24
- 专业: 生物大分子结构与功能
9楼2010-09-12 10:12:29
bigboy123
铜虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 149.8
- 散金: 7
- 帖子: 84
- 在线: 13.3小时
- 虫号: 381419
- 注册: 2007-05-24
- 专业: 生物大分子结构与功能
10楼2010-09-19 11:14:56
