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bigboy123

铜虫 (小有名气)

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[交流] 【分享】看看我做的这个新型PCR增强剂效果怎么样已有16人参与

这个是我偶然发现的一种物质，可以有效提高PCR扩增的产量，翻变所有文献都没有该物质的介绍，因此对国产和进口的Taq酶还比较有效。产品质量可以稳定了，正准备请人公开测试。
挂个产品介绍和刚收到的一个电泳图谱（朋友帮忙做的）在里面，愿意帮我做测试并给我发图片的朋友可以联系我，bsyan_cn@sina.com.cn,发短信也可以。

这个图是朋友帮忙做的电泳图，从左到右1-4是加入增强剂的，5-6是未加的。其他都是无关条带。

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供应PCR增量剂

1楼2010-09-09 11:02:12

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bigboy123

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scelab(金币+7):鼓励新虫！欢迎多来交流！:tiger06: 2010-09-09 23:02:24

实时荧光PCR定量依据是模板刚开始出现扩增时的循环数（Ct值）来进行定量，不是根据PCR终产物来定量的。

   一般Taq酶在PCR循环后期聚合活性和特异性都会下降，从而导致有效的扩增效率下降，因此一般厂家都会添加一些乱七八糟的增强剂来延缓酶的衰竭，我这个由于是非文献的东西，其工作机理也从没有被报告过，对大家的Taq酶才适用。

   在荧光PCR扩增中，这个增强剂可以提高低拷贝样本的荧光信号强度，可以与强样本的扩增信号强度相当，对Ct值没有改变，因此不会改变定量的准确性。
因此我们才推测对低拷贝样本的扩增更有效些。
   电泳法检测的结果比较粗糙，主要是朋友随便拿个样本就给测了，还没有来得及做梯度的PCR扩增效果对比，过几天结果就会上传吧。
   目前做过的试验有37度热稳定性，及反复冻融试验，只要试剂避光和避免反复开盖，基本比较稳定。如果还有什么需要测试的地方，欢迎提点建议，以及帮忙测试，我们将会万分感谢。