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柠檬可乐星新虫 (小有名气)
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头疼的测序结果 已有1人参与
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各位大神：前两天我测了一段LSU的序列，是克隆后送测的，使用的载体是pMD19-T，菌落PCR的条带位置大约是750bp。我要求用M13F正向测序，结果却得到了1133bp的序列，在NCBI里blast，都是 “Expression vector pECIA-14, complete sequence ”之类的结果。当时我就郁闷了，以为自己没做对，然后用我自己的特异性引物在得到的序列里比对一下，居然找到了上游引物，然后我从引物位置往后选了400多bp序列又在NCBI里blast，得到的是我所做的那个属的序列信息。然后我就混乱了 请问有没有那个大虾也遇到过这种情况的啊？求指点 到底是什么原因 |
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