| 查看: 3183 | 回复: 20 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
smd1168毕赤酵母转化问题
|
||
|
划板挑单克隆菌落表面光滑，之前转化未线性化的pPIC3.5k后长出来的单克隆也是表面光滑的，后来发现质粒要线性化，结果转入线性化质粒后菌落菌落形态就变了，表面有菌丝状东西，有点像霉菌，但是是有酒香味的，难道转化进质粒后酵母形态发生变化了么？大家有没遇到过，重复2次都这个结果，万分焦急！！！ [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ] |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有178人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 毕赤酵母电转后PCR验证问题
已经有6人回复
- 毕赤酵母相关问题
已经有6人回复
- 毕赤酵母表达培养基
已经有4人回复
- 关于毕赤酵母SMD1168H的培养问题
已经有4人回复
- 毕赤酵母电转时质粒浓度到底多少最合适？？
已经有10人回复
- 毕赤酵母转化后遗传霉素筛选问题
已经有14人回复
- 毕赤酵母电转化问题求助
已经有26人回复
- 毕赤酵母表达一直不表达
已经有13人回复
- 毕赤酵母培养基配制试剂的采购问题
已经有7人回复
- 关于毕赤酵母pPICZaA载体
已经有7人回复
- 毕赤酵母表达问题求教
已经有19人回复
- 关于毕赤酵母电转化
已经有10人回复
- 关于毕赤酵母gs115可否用转化化学转化
已经有6人回复
- 毕赤酵母发酵的pH问题
已经有6人回复
- Invitrogen 公司关于毕赤酵母表达系统的说明书
已经有205人回复
- 有关毕赤酵母的平板筛选
已经有11人回复
- 毕赤酵母表达的蛋白无活性
已经有8人回复
- 毕赤酵母发酵上清液——脱色素？？
已经有23人回复
- 毕赤酵母表达过程中线性化DNA去磷酸化的问题
已经有6人回复
- 毕赤酵母转化表达
已经有13人回复
- 【求助/交流】毕赤酵母胞外表达上清无活性，但胞内测得活性，WHY?
已经有4人回复
- 【求助/交流】有人用过毕赤酵母GS115吗？
已经有15人回复
- 【求助/交流】关于毕赤酵母电转化
已经有22人回复
- 毕赤酵母表达（总是整合不上）
已经有17人回复
5楼2013-12-23 22:23:10
luwei13566
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 184 (高中生)
- 金币: 4352.9
- 散金: 97
- 红花: 35
- 帖子: 641
- 在线: 261.1小时
- 虫号: 2380655
- 注册: 2013-03-27
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 鼓励发帖积极交流。 2013-12-23 08:56:14
kinshi: 金币+10, ★有帮助 2013-12-24 11:42:14
kinshi: 金币+110, ★★★很有帮助, 谢谢你的热情帮助！ 2013-12-26 07:58:34
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 鼓励发帖积极交流。 2013-12-23 08:56:14
kinshi: 金币+10, ★有帮助 2013-12-24 11:42:14
kinshi: 金币+110, ★★★很有帮助, 谢谢你的热情帮助！ 2013-12-26 07:58:34
|
额，如果有菌丝了那肯定是染菌了啊，酵母的颜色改变没？赶紧去做一个镜检。丝状真菌和酵母菌肯定不一样的~， 如果你做几次都是这个样子的话,可能的原因有： 1.你的出发菌株可能已经染菌了。 2.你转化过程中染的杂菌。如果是电转化最有可能出问题的就是电转化杯，如果实在处理不好就换个试试 3.你的抗性筛选可能有问题。 其实你可以做一个菌落PCR验证一下。如果PCR验证了就直接诱导一次。管他什么形状，关键还是要出蛋白，出活性，如果不出蛋白，没有活性再考虑菌落形态的事情，因为要论证是你的线性化质粒导致菌落形态的改变是一件非常困难的事情。 |
2楼2013-12-23 00:48:42
3楼2013-12-23 08:14:08
4楼2013-12-23 12:10:05
