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anna87

新虫 (初入文坛)

[求助] 为什么菌液PCR的条带比目的基因小很多。 已有5人参与

目的基因1600多bp。切胶回收连PMD-18T载体,转化DH5α,挑白斑摇菌,做PCR,出现的条带在250bp左右,没有出现目的条带,为什么?
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生科院404

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-01-07 08:48:14
建议你再做一次转化,我之前转过一个150bp的基因试了三次才成功呢。
9楼2014-01-05 20:22:50
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不叶珏

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-12-16 21:57:30
没有转进去,空载PCR到的片段差不多是250bp左右
借你一生好不好
2楼2013-12-16 20:09:08
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三蛰

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-01-07 08:47:43
载体自连,多挑几个白斑,一般挑十个,这样就保险了。
我不会!
3楼2013-12-16 23:45:20
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anna87

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 不叶珏 at 2013-12-16 20:09:08
没有转进去,空载PCR到的片段差不多是250bp左右

菌液PCR可以用自己的引物吗?还是要用通用引物,比如说PMD18-T,用M13?
4楼2013-12-19 10:38:14
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