24小时热门版块排行榜    

查看: 1412  |  回复: 3

福兜

新虫 (小有名气)

[求助] PCR灵敏度试验,以克隆后质粒为模板,质粒倍比稀释需要注意些什么问题呢 请高手指教 已有1人参与

PCR目的基因克隆到质粒上,以该质粒为模板进行PCR反应,现在做灵敏度试验,质粒倍比稀释(ddH2O稀释)为模板,为什么倍比稀释的质粒PCR产物电泳后,条带没有逐渐变淡的趋势呢?是我质粒倍比稀释有问题吗?质粒倍比稀释需要注意些什么问题呢?请高手指教
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zilinweizhu

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-12-12 15:33:52
福兜: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-12-12 19:07:37
PCR是指数扩增,在20循环作用就基本趋近饱和,稀释的质粒在扩增达到饱和时,产物是没有多大差别的,你可以看一下PCR反应的指数增长曲线,选择一个合适的循环数吧,光靠稀释是不能比较出差别,或者你可以参考荧光定量的方法实时监测也行
2楼2013-12-12 12:30:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

福兜

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zilinweizhu at 2013-12-12 12:30:54
PCR是指数扩增,在20循环作用就基本趋近饱和,稀释的质粒在扩增达到饱和时,产物是没有多大差别的,你可以看一下PCR反应的指数增长曲线,选择一个合适的循环数吧,光靠稀释是不能比较出差别,或者你可以参考荧光定量 ...

O(∩_∩)O谢谢!
3楼2013-12-12 19:07:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

胖嘿嘿

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 福兜 at 2013-12-12 19:07:53
O(∩_∩)O谢谢!...

您好,请问这个问题您结局了吗?我最近也比较纠结不同浓度质粒PCR后跑胶结果差不多,谢谢啊

发自小木虫Android客户端
4楼2017-04-07 13:36:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 福兜 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 高分子化学与物理调剂 +6 好好好1233 2026-02-28 11/550 2026-03-01 17:47 by 好好好1233
[考博] 26申博 +4 想申博! 2026-02-26 6/300 2026-03-01 17:32 by 想申博!
[考研] 290求调剂 +9 材料专硕调剂; 2026-02-28 11/550 2026-03-01 17:21 by sunny81
[考研] 材料类求调剂 +9 wana_kiko 2026-02-28 10/500 2026-03-01 17:01 by sunny81
[考研] 0805总分292,求调剂 +4 幻想之殇 2026-03-01 4/200 2026-03-01 16:47 by ms629
[考研] 311求调剂 +6 亭亭亭01 2026-03-01 6/300 2026-03-01 15:41 by 324616
[考研] 303求调剂 +4 今夏不夏 2026-03-01 4/200 2026-03-01 14:46 by 嘟嘟小浣熊
[考研] 课题组接收材料类调剂研究生 +3 gaoxiaoniuma 2026-02-28 4/200 2026-03-01 14:30 by jjj三跨
[考研] 材料学调剂 +8 提神豆沙包 2026-02-28 10/500 2026-03-01 14:14 by peike
[考研] 寻找调剂 +4 LYidhsjabdj 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:56 by sunny81
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[考研] 298求调剂 +5 axyz3 2026-02-28 5/250 2026-03-01 06:45 by 刘兵
[考研] 材料调剂 +4 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 4/200 2026-03-01 00:38 by 猫猫球alter
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
[考研] 292求调剂 +3 yhk_819 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:57 by gaoxiaoniuma
[考研] 264求调剂 +3 巴拉巴拉根556 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:31 by gaoxiaoniuma
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
[考研] 0856材料求调剂 +10 hyf hyf hyf 2026-02-28 11/550 2026-02-28 18:50 by 无际的草原
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
请填处理意见