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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】PMD 19 质粒载体 引物 m13 特异性问题 已有4人参与

最近在做转化,用的是宝生物的PMD 19 质粒载体试剂盒,连接转化效率还算比较好,在氨苄板子上也长出来了,不过我想进行M13,RV-M引物PCR得到连接的条带。问题就出来了,我想知道这对引物对19 质粒是不是特异性的,假如用没有转化过的大肠杆菌 基因组作为模板,会不会也会P 到条带?


希望各位达人指点迷津!!
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

不会扩到条带

[ Last edited by gyesang on 2010-11-29 at 21:31 ]
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2010-11-29 21:28:58
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

当然是特异的了。
Thank-you,so-blue.
3楼2010-11-29 21:53:53
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by gyesang at 2010-11-29 21:28:58:
不会扩到条带

[ Last edited by gyesang on 2010-11-29 at 21:31 ]

额 那我怎么就扩增到了  而且 bp 数 也差不多 在一起的
4楼2010-12-02 09:41:51
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1029016431

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 老夏853 at 2010-12-02 09:41:51
额 那我怎么就扩增到了  而且 bp 数 也差不多 在一起的...

楼主跟我想的一样,我也通过实验觉得M13引物特异性没有前辈们说得那么好,可以扩出大肠杆菌的序列的。不知楼主扩空大肠杆菌的PCR条件是如何的?我也想验证一下
势必一飞
5楼2015-12-03 12:04:32
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 1029016431 at 2015-12-03 12:04:32
楼主跟我想的一样,我也通过实验觉得M13引物特异性没有前辈们说得那么好,可以扩出大肠杆菌的序列的。不知楼主扩空大肠杆菌的PCR条件是如何的?我也想验证一下
。...

没试过,你可以试试上来报告,

发自小木虫IOS客户端
6楼2015-12-03 15:30:53
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