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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PMD 19 质粒载体 引物 m13 特异性问题
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】PMD 19 质粒载体 引物 m13 特异性问题 已有4人参与

最近在做转化，用的是宝生物的PMD 19 质粒载体试剂盒，连接转化效率还算比较好，在氨苄板子上也长出来了，不过我想进行M13,RV-M引物PCR得到连接的条带。问题就出来了，我想知道这对引物对19 质粒是不是特异性的，假如用没有转化过的大肠杆菌 基因组作为模板，会不会也会P 到条带？


希望各位达人指点迷津！！
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1楼 2010-11-29 20:22:23
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
不会扩到条带

[ Last edited by gyesang on 2010-11-29 at 21:31 ]
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2010-11-29 21:28:58
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
当然是特异的了。
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Thank-you，so-blue.
3楼2010-11-29 21:53:53
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by gyesang at 2010-11-29 21:28:58:
不会扩到条带

[ Last edited by gyesang on 2010-11-29 at 21:31 ]

额 那我怎么就扩增到了  而且 bp 数 也差不多 在一起的
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4楼2010-12-02 09:41:51
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1029016431

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 老夏853 at 2010-12-02 09:41:51
额 那我怎么就扩增到了  而且 bp 数 也差不多 在一起的...

楼主跟我想的一样，我也通过实验觉得M13引物特异性没有前辈们说得那么好，可以扩出大肠杆菌的序列的。不知楼主扩空大肠杆菌的PCR条件是如何的？我也想验证一下
。
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势必一飞
5楼2015-12-03 12:04:32
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老夏853

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 1029016431 at 2015-12-03 12:04:32
楼主跟我想的一样，我也通过实验觉得M13引物特异性没有前辈们说得那么好，可以扩出大肠杆菌的序列的。不知楼主扩空大肠杆菌的PCR条件是如何的？我也想验证一下
。...

没试过，你可以试试上来报告，

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6楼2015-12-03 15:30:53
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