| 查看: 4268 | 回复: 13 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
Marker条带问题及引物二聚体 已有1人参与
|
||
 急急急！！各位亲，求帮帮忙，马上要做QPCR了，可现在用普通PCR验证为QPCR设计的引物现在都是出了问题，怎么办呢！！！！！ 1，天根DL2000 Marke为2000bp，如图可看到Marker上面三条带有弯曲，而且弥散厉害，是什么原因呢？。 2，设计的引物，貌似都有二聚体？还是发卡结构？分别用下面八对引物跑的鱼的肝和脂肪组织（图3，肝跑出来，脂肪组织织没跑出来）。 3，这引起引物目的基因的片段都是，101-138之间的，但在，1，3，5跑道有大于远目的基因的片段，为什么？ 4，有会oligo软件或NCBI在线BLAST的，能否帮比对下是不是引物的问题。 C1F GGCAACAGCATCCATTCATT 20 2 HAP C1R TGCGTGTGGTGTTGAATATCC 21 2 HAP C2F TCCTAGATGACCCTTCACCTC 21 2 HAP C2R CCAAAGAGCGTTTATTGACCC 21 2 HAP C3F GCCATTCATTCTATCATGCTG 21 2 HAP C3R TCGTGTTGAACATACGCTCGT 21 2 HAP C4F AAGGGACGTTACTTCAAGGTG 21 2 HAP C4R TCCGACTTGTCTGCCAAGAT 20 2 HAP H1F CTGGATGTCCATTTCTGGAA 20 2 HAP H1R AAGGTCAAAGGTCGCAGGA 19 2 HAP H2F TCCACCATCAGCGCACAT 18 2 HAP H2R AGCCCCAGGGAAAGAGAGATA 21 2 HAP ATaF GGAATCTCTCTCACCCGAGTT 21 2 HAP ATaR AATGATGCCACAGTACACTGG 21 2 HAP ATbF CCGAGTTACAGACGGAGAAAA 21 2 HAP ATbR TGATGCCACAGTACACTGGGA 21 2 HAP  3.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
生物质炭与活化剂氢氧化钾混合注意事项
已经有0人回复
-
科研人必读：新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有99人回复
-
BT-11（Omilancor）研究化合物全解析：从分子结构到实验应用要点
已经有0人回复
-
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征
已经有0人回复
-
BT投稿with editor状态快两周了，正常吗
已经有25人回复
-
Silevertinib（BDTX-1535）结构拆解：炔基双环片段为何成为合成瓶颈
已经有0人回复
-
RO4929097 解析：双苯并氮杂䓬骨架与 Notch 通路实验设计要点
已经有0人回复
-
分子量 1157 的 PROTAC 怎么配不析出：SGK3-PROTAC1 的溶解、分装与图谱复核
已经有0人回复
-
logP 6.1 的羧酸怎么配母液：GSK 650394 的溶解窗口与稀释顺序
已经有0人回复
-
从"水不溶"到 71 mg/mL：雷特格韦的 pH 依赖溶解与螯合色谱边界
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 如何检测引物之间是否存在二聚体？
已经有3人回复
- 如何减少引物二聚体
已经有21人回复
- 怎样消除PCR产物中的引物二聚体？
已经有3人回复
- 定量PCR-引物二聚体问题
已经有5人回复
- 求助~~~~~PCR产物条带分析
已经有15人回复
- 半定量RT-PCR电泳条带越来越浅
已经有5人回复
- 请大家帮忙看看引物二聚体的问题
已经有5人回复
- 电泳，条带是黑色的，MARKER和引物二聚体是亮的？
已经有6人回复
- 引物二聚体会不会影响目的基因的迁移?
已经有9人回复
- 引物二聚体如何识别
已经有8人回复
- SSR引物退火温度如何确定，求助！
已经有9人回复
- 电泳图怎么全是引物二聚体？求解
已经有13人回复
- 求问一个问题，dNTP浓度过低是否在PCR反应中就会形成引物二聚体 谢谢
已经有5人回复
- 总dna电泳有条带，但PCR后只有引物二聚体
已经有23人回复
- SYBR荧光定量的溶解曲线
已经有10人回复
- 求解释这pcr是啥问题，帮同学问的^_^
已经有29人回复
- 二聚体变性后成单体吗？
已经有5人回复
- 相同条件的pcr产物，跑出不同的条带，是什么原因[/img][/img][/img]
已经有12人回复
- 空白也PCR出的两条带
已经有19人回复
- 求助：关于二聚体的结合能和nosymm关键字的问题
已经有13人回复
- PCR产物不到200bp条带模糊
已经有10人回复
- 最近在做PCR，同样的体系，同样的模板，引物1能扩出来。引物2、3做不出来，去原因
已经有6人回复
- 【求助/交流】有引物二聚体、非特异性扩增带是怎么回事？
已经有10人回复
- 【求助/交流】PCR引物二聚体问题
已经有11人回复
- 【求助/交流】溶解曲线法及电泳法检查引物二聚体的差异
已经有13人回复
- 【求助/交流】PCR扩增后没有条带是怎么回事?
已经有5人回复
5楼2013-12-09 17:20:22
lm2570
木虫 (正式写手)
- 应助: 33 (小学生)
- 金币: 4591.5
- 散金: 412
- 红花: 25
- 帖子: 379
- 在线: 435.2小时
- 虫号: 867975
- 注册: 2009-10-10
- 性别: MM
- 专业: 免疫学研究新技术与新方法
2楼2013-12-08 16:28:17
cicelyzh
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 10
- 应助: 1662 (讲师)
- 金币: 8693.8
- 红花: 72
- 帖子: 3516
- 在线: 456小时
- 虫号: 1614001
- 注册: 2012-02-13
- 专业: 生物化学
【答案】应助回帖
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-08 17:36:52
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-08 17:36:52
|
你用的cDNA为模板P的？有大片段可能是gDNA没消化干净，而且引物跨内含子。 这里有个网络版的引物分析，你自己检查一下情况。 http://www.idtdna.com/analyzer/Applications/OligoAnalyzer/ |
3楼2013-12-08 16:52:40
4楼2013-12-09 16:16:20
