24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 478  |  回复: 2

柠檬可乐星

新虫 (小有名气)

[求助] 菌落PCR体系配制以及PCR程序的问题

各位大侠:想问关于PCR阳性产物做克隆过程中,菌落PCR的问题。
1、我原始PCR是Nest PCR,那么,在菌落PCR的时候,是不是:如果用1st PCR产物做的克隆,我就用与1st PCR相同的体系配制和PCR程序;相应的,如果用2nd PCR产物做克隆,就用2nd PCR的体系和程序来做菌落PCR?
2、菌落PCR的时候,为什么不需要提取DNA就可以直接做PCR了呢?
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

实验交流

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

越努力越幸运
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-12-05 21:02:13
1. 鉴定阳性转化子的时候因该用插入片段的扩增引物检测,最好还能带上酶切检测。当然用2nd引物也能检测1st片段的克隆,但不如自己的引物靠谱吧。
2.细菌很脆弱的,在PCR仪里烫几下就破裂了,释放出DNA,尤其质粒DNA还是游离的。
金币是赌出来的
2楼2013-12-05 09:48:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

柠檬可乐星

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wjswj at 2013-12-05 09:48:29
1. 鉴定阳性转化子的时候因该用插入片段的扩增引物检测,最好还能带上酶切检测。当然用2nd引物也能检测1st片段的克隆,但不如自己的引物靠谱吧。
2.细菌很脆弱的,在PCR仪里烫几下就破裂了,释放出DNA,尤其质粒DN ...

谢谢您!回答的很详细。
PCR程序是不变的吧?
越努力越幸运
3楼2013-12-05 17:51:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 柠檬可乐星 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 279 分 求调剂 +4 睡个好觉_16 2026-03-24 4/200 2026-03-27 15:05 by 醉在风里
[材料工程] 一志愿C9材料与化工专业总分300求调剂 +7 曼111 2026-03-24 8/400 2026-03-27 13:53 by 杨杨杨紫
[考研] 一志愿211,335分,0856,求调剂院校和导师 +4 倾____萧 2026-03-27 5/250 2026-03-27 11:52 by zhshch
[论文投稿] Journal of Mechanical Science and Technology +3 Russ_ss 2026-03-25 5/250 2026-03-27 10:49 by 陆小果画大饼
[考研] 329求调剂 +7 钮恩雪 2026-03-25 7/350 2026-03-27 04:28 by wxiongid
[考研] 321求调剂 +6 wasdssaa 2026-03-26 6/300 2026-03-26 20:57 by sanrepian
[考研] 材料调剂 5+4 想要一壶桃花水 2026-03-25 10/500 2026-03-26 19:56 by 不吃魚的貓
[考研] 中国科学院深圳先进技术研究院-光纤传感课题组招生-中国科学院大学、深圳理工大学联培 +5 YangTyu1 2026-03-26 5/250 2026-03-26 18:27 by 猫咪猫咪呀
[考研] 271求调剂 +6 生如夏花… 2026-03-22 6/300 2026-03-26 16:48 by 张凯十八号
[考研] 085602 289分求调剂 +8 WWW西西弗斯 2026-03-24 8/400 2026-03-26 16:33 by 不吃魚的貓
[考研] 297求调剂 +6 田洪有 2026-03-26 6/300 2026-03-26 15:55 by 不吃魚的貓
[考研] 材料277求调剂 +5 min3 2026-03-24 5/250 2026-03-26 15:13 by zzll406
[考研] 07化学303求调剂 +5 睿08 2026-03-25 5/250 2026-03-25 22:46 by 418490947
[考研] 302求调剂 +4 锦衣卫藤椒 2026-03-25 4/200 2026-03-25 16:29 by 功夫疯狂
[考研] 282求调剂 +3 wcq131415 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:16 by userper
[考研] 材料调剂 +3 iwinso 2026-03-23 3/150 2026-03-25 11:29 by greychen00
[考研] 086003食品工程求调剂 +6 淼淼111 2026-03-24 6/300 2026-03-25 10:29 by 3Strings
[考研] 上海电力大学材料防护与新材料重点实验室招收调剂研究生(材料、化学、电化学,环境) +4 我爱学电池 2026-03-23 4/200 2026-03-25 00:59 by 1027_324
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
[考研] 一志愿深大,0703化学,总分302,求调剂 +4 七月-七七 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:20 by 学员8dgXkO
信息提示
请填处理意见