应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR反应体系的配制
121/2返回列表12下一页
查看: 2014  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

hclcarl

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】PCR反应体系的配制 已有6人参与

宋体
小弟现在通过兼并引物扩增片段 可是设计了10引物连一条杂带也没有出 不知道是不是反应体系的事 在这里想请各位大侠帮我看一下我的反应体系有没有问题。
我的反应体系是：10*buffer  2.5ul
                                  MgCl2  1.5ul
                                   dNTP  2ul
                                     Taq  0.125ul
                                        水 15.875ul
                                     合计 22ul
加上引物和cDNA一共是25ul
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-12-17 09:57:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mxianl

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
建议你写上PCR体系中各种成分的浓度,只有体积是没法知道终浓度.
赞一下(1人) 回复此楼
观海听风
2楼2010-12-17 14:17:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopyzxx

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
LZ如果对反应体系没把握就用预混的酶吧。
赞一下(1人) 回复此楼
生物资源交流QQ群：1044518333
3楼2010-12-17 14:48:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hclcarl

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by snoopyzxx at 2010-12-17 14:48:21:
LZ如果对反应体系没把握就用预混的酶吧。

什么是 预混的酶？不明白
赞一下 回复此楼
4楼2010-12-17 15:15:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hclcarl

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by mxianl at 2010-12-17 14:17:18:
建议你写上PCR体系中各种成分的浓度,只有体积是没法知道终浓度.

谢谢 我用的是宝生物卖的Taq酶 买回来的时候各种试剂都是分装好的 自己根据体系用量自己加就行了 Taq是5U\ul  MgCl2 是25mM Buffer 和都没有标 不知道合适的浓度是多少
赞一下 回复此楼
5楼2010-12-17 15:36:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

j2

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by hclcarl at 2010-12-17 15:15:08:

什么是 预混的酶？不明白

应该是说的mix吧
赞一下 回复此楼
修炼ｉｎｇ，当虫仙……
6楼2010-12-17 15:36:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopyzxx

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
PCR的所有试剂除引物、模板外的所有组分都已经预混在一起的。不用自己配。
赞一下(1人) 回复此楼
生物资源交流QQ群：1044518333
7楼2010-12-17 15:43:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopyzxx

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by j2 at 2010-12-17 15:36:28:

应该是说的mix吧

对的。
回复此楼
生物资源交流QQ群：1044518333
8楼2010-12-17 15:43:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

love_st

金虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我估计你的dNTPs是10mM的，那你加2ul终浓度就是0.8mM了感觉上有点高了
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2010-12-17 15:49:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangds

金虫 (正式写手)
降低Tm值扩增试试
赞一下 回复此楼
10楼2010-12-17 15:50:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 hclcarl 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-16 3/150 2026-03-16 10:07 by 求调剂zz
[考研] 326求调剂 +4 上岸的小葡 2026-03-15 5/250 2026-03-16 08:39 by Linda Hu
[考研] 调剂 +8 调剂的考研学生 2026-03-09 8/400 2026-03-15 22:14 by Winj1e
[考研] 中科大材料与化工319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:10 by ms629
[考研] 材料与化工 323 英一+数二+物化，一志愿：哈工大 本人本科双一流 +4 自由的_飞翔 2026-03-13 5/250 2026-03-14 19:39 by hmn_wj
[考研] 289求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-14 6/300 2026-03-14 18:58 by userper
[考研] 中科大材料专硕319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-13 3/150 2026-03-14 18:10 by houyaoxu
[考研] 复试调剂 +3 呼呼？~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
[考研] 297求调剂 +4 学海漂泊 2026-03-13 4/200 2026-03-14 11:51 by 热情沙漠
[考研] 材料080500调剂求收留 +3 一颗meteor 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:54 by peike
[考研] 材料371求调剂 +9 鳄鱼? 2026-03-11 11/550 2026-03-13 22:53 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +5 邱gl 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:37 by JourneyLucky
[考研] 315求调剂 +9 小羊小羊_ 2026-03-11 10/500 2026-03-13 21:13 by SXNU李老师
[考研] 285化工学硕求调剂（081700） +6 柴郡猫_ 2026-03-12 6/300 2026-03-13 20:46 by hmn_wj
[考研] 0703化学求调剂 +7 绿豆芹菜汤 2026-03-12 7/350 2026-03-13 17:25 by njzyff
[考研] 求b区学校调剂 +3 周56 2026-03-11 3/150 2026-03-13 16:20 by JourneyLucky
[考研] 工科278分求调剂 +5 周慢热啊 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:49 by JourneyLucky
[考研] 化工学硕306求调剂 +9 42838695 2026-03-12 9/450 2026-03-13 10:16 by houyaoxu
[考研] 420求调剂 +4 莫向外求11 2026-03-10 6/300 2026-03-12 14:41 by ruiyingmiao
[考研] 290求调剂 +3 柯淮然 2026-03-10 8/400 2026-03-11 13:48 by 柯淮然
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭