应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR反应体系的配制
121/2返回列表12下一页
查看: 2263  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

hclcarl

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】PCR反应体系的配制 已有6人参与

宋体
小弟现在通过兼并引物扩增片段 可是设计了10引物连一条杂带也没有出 不知道是不是反应体系的事 在这里想请各位大侠帮我看一下我的反应体系有没有问题。
我的反应体系是：10*buffer  2.5ul
                                  MgCl2  1.5ul
                                   dNTP  2ul
                                     Taq  0.125ul
                                        水 15.875ul
                                     合计 22ul
加上引物和cDNA一共是25ul
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-12-17 09:57:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mxianl

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
建议你写上PCR体系中各种成分的浓度,只有体积是没法知道终浓度.
赞一下(1人) 回复此楼
观海听风
2楼2010-12-17 14:17:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopyzxx

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
LZ如果对反应体系没把握就用预混的酶吧。
赞一下(1人) 回复此楼
VX：19192310212；公众号：生物技术与IVD
3楼2010-12-17 14:48:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hclcarl

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by snoopyzxx at 2010-12-17 14:48:21:
LZ如果对反应体系没把握就用预混的酶吧。

什么是 预混的酶？不明白
赞一下 回复此楼
4楼2010-12-17 15:15:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hclcarl

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by mxianl at 2010-12-17 14:17:18:
建议你写上PCR体系中各种成分的浓度,只有体积是没法知道终浓度.

谢谢 我用的是宝生物卖的Taq酶 买回来的时候各种试剂都是分装好的 自己根据体系用量自己加就行了 Taq是5U\ul  MgCl2 是25mM Buffer 和都没有标 不知道合适的浓度是多少
赞一下 回复此楼
5楼2010-12-17 15:36:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

j2

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by hclcarl at 2010-12-17 15:15:08:

什么是 预混的酶？不明白

应该是说的mix吧
赞一下 回复此楼
修炼ｉｎｇ，当虫仙……
6楼2010-12-17 15:36:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopyzxx

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
PCR的所有试剂除引物、模板外的所有组分都已经预混在一起的。不用自己配。
赞一下(1人) 回复此楼
VX：19192310212；公众号：生物技术与IVD
7楼2010-12-17 15:43:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snoopyzxx

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by j2 at 2010-12-17 15:36:28:

应该是说的mix吧

对的。
回复此楼
VX：19192310212；公众号：生物技术与IVD
8楼2010-12-17 15:43:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

love_st

金虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我估计你的dNTPs是10mM的，那你加2ul终浓度就是0.8mM了感觉上有点高了
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2010-12-17 15:49:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangds

金虫 (正式写手)
降低Tm值扩增试试
赞一下 回复此楼
10楼2010-12-17 15:50:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 hclcarl 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 小木虫没落了，除了祈祷帖子，几乎看不到有价值的帖子 +9 botar 2026-07-14 9/450 2026-07-15 14:50 by Vivilian
[基金申请] 会评 +3 无名者登山 2026-07-15 3/150 2026-07-15 14:45 by Vivilian
[基金申请] E口青C会评结束了吗？ 60+3 小小书虫c 2026-07-14 7/350 2026-07-15 14:45 by Bowerbird
[基金申请] 生命口C13面上会评时间 +6 luckinging 2026-07-14 9/450 2026-07-15 14:39 by 雨冰共舞
[教师之家] 内心匮乏 +13 水冰月月野兔 2026-07-12 13/650 2026-07-15 14:21 by jiduquegai
[文学芳草园] 你可曾有过这种感受？ +3 Jeanya 2026-07-09 6/300 2026-07-15 11:07 by mbtwt
[论文投稿] 农业机械学报投稿周期 +3 G0DLIN 2026-07-14 7/350 2026-07-15 09:26 by xs74101122
[基金申请] 国自然面上D口祈祷 +4 monkeynana 2026-07-14 4/200 2026-07-15 09:14 by 白水煮
[论文投稿] 跨出版社商投稿 20+4 倪好520 2026-07-13 4/200 2026-07-15 08:35 by bobvan
[基金申请] E口会评 +8 布布和一二 2026-07-13 10/500 2026-07-14 18:17 by 旋风马1987
[基金申请] 不要再数国自然申请书的 filecode 的分隔符个数了 +13 sadpencil 2026-07-12 20/1000 2026-07-14 13:12 by 杠就是你对
[基金申请] 明天E口面上会评 +8 布布和一二 2026-07-12 9/450 2026-07-13 22:59 by QTSorange
[论文投稿] MSER送审了还被拒稿 +4 S778950906 2026-07-08 6/300 2026-07-13 16:22 by tfang
[基金申请] 祈祷青基必中 50+6 hadengry 2026-07-09 16/800 2026-07-12 20:31 by 登山虫虫
[考博] 27届辽宁大学应届毕业生申博 +3 可乐微风大海 2026-07-09 3/150 2026-07-10 21:23 by 贪玩的研究僧
[基金申请] 关于如何从代码看上不上会 +17 且听虎啸 2026-07-09 23/1150 2026-07-10 19:51 by sdfapple719
[有机交流] chemdraw 20+5 ?慕鱼? 2026-07-08 6/300 2026-07-10 15:37 by 紫枫星域
[基金申请] b口会评 +6 当空照 2026-07-08 6/300 2026-07-09 20:49 by tonyliu0401
[考研] 在职考研 +6 wu5d 2026-07-08 7/350 2026-07-09 16:40 by 化工小霸王呀
[基金申请] 化学口会评？应用基础研究和基础研究，希望能分开 +3 Tide man 2026-07-08 3/150 2026-07-09 11:36 by dede5556
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭