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hclcarl

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】PCR反应体系的配制 已有6人参与

宋体
小弟现在通过兼并引物扩增片段 可是设计了10引物连一条杂带也没有出 不知道是不是反应体系的事 在这里想请各位大侠帮我看一下我的反应体系有没有问题。
我的反应体系是:10*buffer  2.5ul
                                  MgCl2  1.5ul
                                   dNTP  2ul
                                     Taq  0.125ul
                                        水 15.875ul
                                     合计 22ul
加上引物和cDNA一共是25ul
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hclcarl

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by snoopyzxx at 2010-12-17 14:48:21:
LZ如果对反应体系没把握就用预混的酶吧。

什么是 预混的酶?不明白
4楼2010-12-17 15:15:08
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mxianl

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
建议你写上PCR体系中各种成分的浓度,只有体积是没法知道终浓度.
观海听风
2楼2010-12-17 14:17:18
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
LZ如果对反应体系没把握就用预混的酶吧。
VX:19192310212;公众号:生物技术与IVD
3楼2010-12-17 14:48:21
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hclcarl

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by mxianl at 2010-12-17 14:17:18:
建议你写上PCR体系中各种成分的浓度,只有体积是没法知道终浓度.

谢谢 我用的是宝生物卖的Taq酶 买回来的时候各种试剂都是分装好的 自己根据体系用量自己加就行了 Taq是5U\ul  MgCl2 是25mM Buffer 和都没有标 不知道合适的浓度是多少
5楼2010-12-17 15:36:04
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