24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1996  |  回复: 1

柠檬可乐星

新虫 (小有名气)

[求助] 为什么不能用PCR克隆之后再PCR的阳性产物直接测序?

各位大侠:本人刚开始学做分子,菜鸟一枚。之前PCR得到的产物直接测序结果不好,想做一下克隆。我看克隆的操作步骤中,挑取一些单克隆做菌落PCR,然后PCR结果为阳性的菌落再培养,拿养好的菌液送测序。
我不是很了解菌液测序的原理,很好奇 为什么不能用 结果为阳性的菌落PCR产物直接测序,而是要再养菌,用菌液测序呢?
多谢指点!
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

实验交流

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

越努力越幸运
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
柠檬可乐星: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 解释的非常详细 多谢 2013-12-05 08:22:43
PCR说白了就是体外复制DNA,会有出错的可能,尤其是PCR条件控制不严格的时候。细菌的DNA复制有严格的控制机理,尤其是用于克隆的工程菌株,质粒的复制几乎可以说不会出错。你已经克隆到菌里,目的是测定载体里携带的序列是否正确,用PCR产物测序如果出错可能是做菌落PCR时 的错误,你仍然无法得知克隆的序列是否正确。用菌液测序是公司自己从菌里提模板进行测序,避免PCR获取模板时可能出现的错配。
2楼2013-12-05 07:44:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 柠檬可乐星 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 296求调剂 +11 汪!?! 2026-04-09 12/600 2026-04-15 18:32 by AN流800
[考研] 22408 312求调剂 +18 门路摸摸 2026-04-14 19/950 2026-04-15 14:23 by 巴塞罗那2015
[考研] 085801电气专硕272求调剂 +19 电气李 2026-04-13 21/1050 2026-04-15 13:37 by 黑科技矿业
[考研] 367求调剂 +11 hffQAQ 2026-04-09 11/550 2026-04-14 17:48 by lhj2009
[考研] 材料相关专业344求调剂双非工科学校或课题组 +21 hualkop 2026-04-12 22/1100 2026-04-14 17:44 by lhj2009
[考研] 一志愿中南大学 0855 机械 286 求调剂 +11 不会吃肉 2026-04-12 11/550 2026-04-13 21:59 by bljnqdcc
[考研] 一志愿西交机械专硕求调剂 +9 求上岸的小王 2026-04-10 9/450 2026-04-13 16:08 by jiangguiquan11
[考研] 339求调剂 +4 hanwudada 2026-04-12 4/200 2026-04-13 12:03 by 蓝云思雨
[考研] 314求调剂 +24 wakeluofu 2026-04-09 25/1250 2026-04-13 08:58 by lhj2009
[考研] 296求调剂 +14 汪!?! 2026-04-10 16/800 2026-04-12 10:48 by zhouyuwinner
[考研] 085410 273求调剂 +10 X1999 2026-04-09 10/500 2026-04-12 09:24 by 逆水乘风
[考研] 材料与化工300求调剂 +39 肖开文 2026-04-09 43/2150 2026-04-12 01:30 by 秋豆菜芽
[考研] 283求调剂 086004考英二数二 +17 那个噜子 2026-04-10 18/900 2026-04-11 16:27 by 明月此时有
[考研] 本人女孩 +7 吼吼, 2026-04-10 9/450 2026-04-11 14:45 by ACS Nano——
[考研] 0858求调剂 5+5 Gky09300550, 2026-04-10 8/400 2026-04-10 19:13 by chemisry
[考研] 求调剂 +5 不会飞的鱼@ 2026-04-10 5/250 2026-04-10 19:07 by chemisry
[考研] 314求调剂 +18 xhhdjdjsjks 2026-04-09 19/950 2026-04-10 18:53 by HPUCZ
[考研] 本9 一志愿西工大085601 324求调剂 +5 wysyjs25 2026-04-10 5/250 2026-04-10 16:57 by luoyongfeng
[考研] 江苏大学 工科调剂 捡漏 +3 Evan_Liu 2026-04-09 5/250 2026-04-10 10:22 by Evan_Liu
[考研] 337求调剂 +4 Gky09300550, 2026-04-09 4/200 2026-04-09 17:18 by 帕尔马拉特
信息提示
请填处理意见