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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » SDS-PAGE问题分析
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celtlxx

铜虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE问题分析

请大家帮我分析下，为什么最近跑SDS-page老是出现泳道条带间相互弥散，很不清晰。
SDS-PAGE问题分析
KC4LTU_9_EPIOFIT]~VJ_@2.jpg
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1楼 2013-11-29 15:08:08
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不明白你说的泳道间相互弥散指什么。如果你指的是纵向条纹，我觉得可能是你的电泳缓冲液不是很干净。
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3楼2013-11-30 03:07:06
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
celtlxx: 金币+5 2013-12-03 09:57:41
我认为，其实是SDS的质量问题。你要用SDS高质量的。另外缓冲溶剂中千万不能含有钾离子！
楼主可以另外配置样品缓冲液，要用高质量的SDS和高质量的水来做。 而且蛋白样品最好不含钾离子。
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
10楼2013-12-02 22:08:23
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阳光紫昕

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by HarveyWang at 2013-12-02 22:08:23
我认为，其实是SDS的质量问题。你要用SDS高质量的。另外缓冲溶剂中千万不能含有钾离子！
楼主可以另外配置样品缓冲液，要用高质量的SDS和高质量的水来做。 而且蛋白样品最好不含钾离子。

我认为，其实是SDS的质量问题。你要用SDS高质量的。另外缓冲溶剂中千万不能含有钾离子！
楼主可以另外配置样品缓冲液，要用高质量的SDS和高质量的水来做。 而且蛋白样品最好不含钾离子。
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15楼2013-12-05 20:53:45
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celtlxx

铜虫 (初入文坛)
都没人回复吗？我都急死了。。。。实验还好，都毁在这图上了。
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2楼2013-11-29 15:39:18
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普通回帖

celtlxx

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-11-30 03:07:06
不明白你说的泳道间相互弥散指什么。如果你指的是纵向条纹，我觉得可能是你的电泳缓冲液不是很干净。

就是顶部，各种条纹，从上到下，各个泳道都有，跟下雨一样。。。
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4楼2013-11-30 13:25:08
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
4楼: Originally posted by celtlxx at 2013-11-30 13:25:08
就是顶部，各种条纹，从上到下，各个泳道都有，跟下雨一样。。。...

你是否反复用了电极缓冲液，尤其是上槽的？或者是stacking胶的tris污染了。
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5楼2013-12-01 02:21:33
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celtlxx

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-12-01 02:21:33
你是否反复用了电极缓冲液，尤其是上槽的？或者是stacking胶的tris污染了。...

没用，换新的，也是一样。。。
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6楼2013-12-02 10:20:39
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ljsh

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
上样量过多
样品盐离子浓度过高
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7楼2013-12-02 11:46:06
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celtlxx

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by ljsh at 2013-12-02 11:46:06
上样量过多
样品盐离子浓度过高

不会啊，上样量才10uL，而且已经除盐了都。。。
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8楼2013-12-02 15:55:52
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

没有加marker?要是marker也跑成这样，应该是电泳液的问题了吧
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天道酬勤
9楼2013-12-02 21:09:00
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