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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » SDS-PAGE问题分析
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celtlxx

铜虫 (初入文坛)
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9楼: Originally posted by 随风飘摇11 at 2013-12-02 21:09:00
没有加marker?要是marker也跑成这样，应该是电泳液的问题了吧

marker也是如此啊，电泳液我重新换了，也是如此，气死人了都。。。
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11楼2013-12-03 09:58:31
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celtlxx

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by HarveyWang at 2013-12-02 22:08:23
我认为，其实是SDS的质量问题。你要用SDS高质量的。另外缓冲溶剂中千万不能含有钾离子！
楼主可以另外配置样品缓冲液，要用高质量的SDS和高质量的水来做。 而且蛋白样品最好不含钾离子。

电泳液，我们一般是先配成10X的母液，用的时候用超纯水稀释完用。蛋白样品应该不会有钾离子吧。
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12楼2013-12-03 10:00:09
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zhaoyiheng

铁虫 (初入文坛)
good
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13楼2013-12-03 10:44:31
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
引用回帖:
12楼: Originally posted by celtlxx at 2013-12-03 10:00:09
电泳液，我们一般是先配成10X的母液，用的时候用超纯水稀释完用。蛋白样品应该不会有钾离子吧。...

样品缓冲液！
样品缓冲液！
样品缓冲液！

你煮蛋白的那个！

另，破碎蛋白样品，不要用含钾离子的缓冲溶液。
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
14楼2013-12-03 13:47:59
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阳光紫昕

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by HarveyWang at 2013-12-02 22:08:23
我认为，其实是SDS的质量问题。你要用SDS高质量的。另外缓冲溶剂中千万不能含有钾离子！
楼主可以另外配置样品缓冲液，要用高质量的SDS和高质量的水来做。 而且蛋白样品最好不含钾离子。

我认为，其实是SDS的质量问题。你要用SDS高质量的。另外缓冲溶剂中千万不能含有钾离子！
楼主可以另外配置样品缓冲液，要用高质量的SDS和高质量的水来做。 而且蛋白样品最好不含钾离子。
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15楼2013-12-05 20:53:45
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celtlxx

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 阳光紫昕 at 2013-12-05 20:53:45
我认为，其实是SDS的质量问题。你要用SDS高质量的。另外缓冲溶剂中千万不能含有钾离子！
楼主可以另外配置样品缓冲液，要用高质量的SDS和高质量的水来做。 而且蛋白样品最好不含钾离子。...

样品缓冲液肯定没有问题，我是按配方来的，而且蛋白样品就是通过大肠杆菌诱导表达一种酶，并没有什么钾离子啊。我怀疑会不会是电极液问题，我的电极液都是用母液直接稀释完使用，是不是最好先用现配啊。。。
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16楼2013-12-06 10:37:02
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celtlxx

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 随风飘摇11 at 2013-12-02 21:09:00
没有加marker?要是marker也跑成这样，应该是电泳液的问题了吧

点marker也是如此啊啊 啊啊，郁闷死了。而是实验室其他人跑SDS-PAGE也是这样的效果，看来不是我操作问题。。。
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17楼2013-12-06 10:39:09
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小七zy

新虫 (初入文坛)
测一下你配胶用的Tris  pH是不是变了，我之前也遇到过这种，重新配了Tris后就好了
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18楼2013-12-20 10:07:56
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