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hudandan604

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR酶、模板、dNTP换了以后P出来的目的条带很少，在目的条带上有一团很亮，是为什么？

PCR酶、模板、dNTP换了以后P出来的目的条带很少，在目的条带上有一团很亮，是为什么，要继续优化条件吗？以前同样的条件P的结果很好，只有一条目的条带！已经降低了模板浓度。
PCR酶、模板、dNTP换了以后P出来的目的条带很少，在目的条带上有一团很亮，是为什么？
11-6PCR.jpg
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1楼 2013-11-07 11:34:37
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wanghx_2012

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看图应该是你提取的基因组DNA不干净，下面的白色团是基因组DNA，上面的很浅的条带是PCR扩增的目的条带。其中2.3.J都有目的条带。建议将提取的DNA纯化后在用作模板。
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9楼2013-11-08 13:50:50
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沙门小rna

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-07 15:55:52
你看，首先。能在eb染色出亮的，是核酸。然后大小，亮团从10kpb开始，拖尾下来，应该是基因组dna。。童鞋。你用基因组做模板的？可能量和浓度太多了。
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应助之星就是我~没错。你没有看错~
2楼2013-11-07 14:12:01
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zhangyep121

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-07 15:55:59
基因组量太大了，如果想既不影响目的条带，又排除大量基因组核酸，建议你割胶纯化后，再PCR，就可以得到比较干净的目的条带了
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3楼2013-11-07 15:11:50
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hudandan604

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 沙门小rna at 2013-11-07 14:12:01
你看，首先。能在eb染色出亮的，是核酸。然后大小，亮团从10kpb开始，拖尾下来，应该是基因组dna。。童鞋。你用基因组做模板的？可能量和浓度太多了。

我是用基因组做的模板。提基因组的时候菌体太浓了，所以基因组的量很多？我同学用2的基因组P他的片段都没有很来那个的一团呢，而且他加的量还比我的多。
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4楼2013-11-07 18:18:10
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