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hudandan604

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR酶、模板、dNTP换了以后P出来的目的条带很少，在目的条带上有一团很亮，是为什么？

PCR酶、模板、dNTP换了以后P出来的目的条带很少，在目的条带上有一团很亮，是为什么，要继续优化条件吗？以前同样的条件P的结果很好，只有一条目的条带！已经降低了模板浓度。
PCR酶、模板、dNTP换了以后P出来的目的条带很少，在目的条带上有一团很亮，是为什么？
11-6PCR.jpg
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1楼 2013-11-07 11:34:37
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hudandan604

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 沙门小rna at 2013-11-07 14:12:01
你看，首先。能在eb染色出亮的，是核酸。然后大小，亮团从10kpb开始，拖尾下来，应该是基因组dna。。童鞋。你用基因组做模板的？可能量和浓度太多了。

我是用基因组做的模板。提基因组的时候菌体太浓了，所以基因组的量很多？我同学用2的基因组P他的片段都没有很来那个的一团呢，而且他加的量还比我的多。
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4楼2013-11-07 18:18:10
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沙门小rna

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-07 15:55:52
你看，首先。能在eb染色出亮的，是核酸。然后大小，亮团从10kpb开始，拖尾下来，应该是基因组dna。。童鞋。你用基因组做模板的？可能量和浓度太多了。
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应助之星就是我~没错。你没有看错~
2楼2013-11-07 14:12:01
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zhangyep121

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-07 15:55:59
基因组量太大了，如果想既不影响目的条带，又排除大量基因组核酸，建议你割胶纯化后，再PCR，就可以得到比较干净的目的条带了
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3楼2013-11-07 15:11:50
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hudandan604

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhangyep121 at 2013-11-07 15:11:50
基因组量太大了，如果想既不影响目的条带，又排除大量基因组核酸，建议你割胶纯化后，再PCR，就可以得到比较干净的目的条带了

是对基因组割胶纯化吗？拿这个产物切胶回收的时候完全看不到目的条带呢！下午做了两个体系、4个温度梯度，不知道效果怎么样。多谢了！
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5楼2013-11-07 18:21:06
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