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hudandan604

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR酶、模板、dNTP换了以后P出来的目的条带很少,在目的条带上有一团很亮,是为什么?

PCR酶、模板、dNTP换了以后P出来的目的条带很少,在目的条带上有一团很亮,是为什么,要继续优化条件吗?以前同样的条件P的结果很好,只有一条目的条带!已经降低了模板浓度。
PCR酶、模板、dNTP换了以后P出来的目的条带很少,在目的条带上有一团很亮,是为什么?
11-6PCR.jpg
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zhangyep121

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-11-07 15:55:59
基因组量太大了,如果想既不影响目的条带,又排除大量基因组核酸,建议你割胶纯化后,再PCR,就可以得到比较干净的目的条带了
3楼2013-11-07 15:11:50
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沙门小rna

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-11-07 15:55:52
你看,首先。能在eb染色出亮的,是核酸。然后大小,亮团从10kpb开始,拖尾下来,应该是基因组dna。。童鞋。你用基因组做模板的?可能量和浓度太多了。
应助之星就是我~没错。你没有看错~
2楼2013-11-07 14:12:01
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hudandan604

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 沙门小rna at 2013-11-07 14:12:01
你看,首先。能在eb染色出亮的,是核酸。然后大小,亮团从10kpb开始,拖尾下来,应该是基因组dna。。童鞋。你用基因组做模板的?可能量和浓度太多了。

我是用基因组做的模板。提基因组的时候菌体太浓了,所以基因组的量很多?我同学用2的基因组P他的片段都没有很来那个的一团呢,而且他加的量还比我的多。
4楼2013-11-07 18:18:10
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hudandan604

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zhangyep121 at 2013-11-07 15:11:50
基因组量太大了,如果想既不影响目的条带,又排除大量基因组核酸,建议你割胶纯化后,再PCR,就可以得到比较干净的目的条带了

是对基因组割胶纯化吗?拿这个产物切胶回收的时候完全看不到目的条带呢!下午做了两个体系、4个温度梯度,不知道效果怎么样。多谢了!
5楼2013-11-07 18:21:06
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