| 查看: 3723 | 回复: 13 | |||||
[求助]
SDS-PAGE中蛋白条带位置不一致
|
|||||
| 前后几次SDS-PAGE中，同样的样品跑出来的蛋白条带位置与Marker对比不一样，第一次跑的时候，我要的目的蛋白条带与Marker 的25 kd 的带几乎一样大，但是后来跑的时候那条带又比Marker 25 KD 的带大了，在它上边，哪位大侠知道这是什么原因呀？！ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 蛋白质生物学实验经验 | 蛋白表达纯化与检测 |
» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有119人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 切胶纯化蛋白，加loadingbuffer跑sds-page没有条带。
已经有12人回复
- SDS-PAGE 电泳莫名其妙的多出一个条带求解！
已经有6人回复
- SDS-page 原核表达蛋白 电泳条带弥散
已经有6人回复
- 求解：纯化蛋白跑SDS-PAGE，没有条带
已经有13人回复
- SDS-PAGE还原与非还原电泳条带一样能说明该蛋白只有一个亚基吗
已经有6人回复
- 求助 sds-page 条带虚，marker 最后一条带拖尾
已经有10人回复
- Tricine SDS PAGE蛋白电泳问题
已经有4人回复
- 请教提取拟南芥叶片总蛋白SDS-PAGE时较亮的条带对应的蛋白？
已经有29人回复
- SDS-PAGE 电泳时蛋白样品下不去什么原因？
已经有7人回复
- SDS-PAGE电泳求助，为什么上面条带清晰，下面不清晰，而且会有条像糊了似的带
已经有8人回复
- SDS-PAGE：缓冲液和蛋白样品混合后变浅绿色？？？
已经有13人回复
- 为什么SDS-PAGE胶在做胶的时候会出现不均匀的条纹？
已经有17人回复
- sds—page 0431marker条带与说明书不一致
已经有3人回复
- SDS-page电泳蛋白样的处理
已经有4人回复
- 蛋白质sds-page电泳图分析
已经有24人回复
- SDS-PAGE蛋白电泳同一蛋白不同loading buffer条带不一样
已经有7人回复
- SDS-PAGE 电泳蛋白分子量飘移
已经有12人回复
- SDS-PAGE蛋白电泳
已经有23人回复
- SDS-PAGE蛋白电泳条带问题
已经有7人回复
- 【求助/交流】从SDS-PAGE凝胶中回收蛋白条带用哪个试剂盒好？
已经有11人回复
凌波丽
专家顾问 (知名作家)
-
专家经验: +218 - MolEPI: 44
- 应助: 397 (硕士)
- 贵宾: 0.044
- 金币: 2118.9
- 散金: 10
- 红花: 208
- 帖子: 5633
- 在线: 571.6小时
- 虫号: 1766465
- 注册: 2012-04-19
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
- 管辖: 生物科学综合
2楼2013-10-23 10:40:00
凌波丽
专家顾问 (知名作家)
-
专家经验: +218 - MolEPI: 44
- 应助: 397 (硕士)
- 贵宾: 0.044
- 金币: 2118.9
- 散金: 10
- 红花: 208
- 帖子: 5633
- 在线: 571.6小时
- 虫号: 1766465
- 注册: 2012-04-19
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
- 管辖: 生物科学综合
【答案】应助回帖
|
如果真的形成分子间的二硫键或酰胺键或者其他的共价键，SDS是不可能对其加以断裂和直接的阻止分子间的二硫键或酰胺键的形成的；因为要可能形成分子间的二硫键或酰胺键的氨基酸侧链基团在变性的蛋白质中处于分子表面，而且PH和反应物浓度合适又处于溶液环境和暴露于空气中，SDS是不可能阻碍两个巯基氧化为一个二硫键和羧基与氨基形成酰胺键。SDS使得蛋白质变性成为直的杆状分子倒是有可能在一定程度上消除球形蛋白质的空间位阻，当然SDS结合上蛋白质表面有形成新的空间位阻，但是SDS不可能每时每刻都结合在蛋白质的表面，而且对于杆状的蛋白质的末端SDS是封堵不住的。再有，蛋白质也许原来就有二硫键存在，SDS本身是不可能打开二硫键的，当然如果上样时加上DTT，巯基乙醇当然能打开二硫键，但是SDS-PAGE不是一定要加上DTT，巯基乙醇，楼主也没有提供此种信息。 何况即使加了DTT，巯基乙醇，酰胺键在一定条件下还是会形成，与SDS无关。 所以4楼的说法不对！ 其他的共价键情况很复杂，这里不讨论。 |
8楼2013-10-24 01:19:59
3楼2013-10-23 12:16:58
20083630zhan
木虫 (正式写手)
- 应助: 28 (小学生)
- 金币: 2739.2
- 散金: 39
- 帖子: 376
- 在线: 332小时
- 虫号: 2009205
- 注册: 2012-09-18
- 性别: GG
- 专业: 有机金属化学
4楼2013-10-23 22:42:04
凌波丽
专家顾问 (知名作家)
-
专家经验: +218 - MolEPI: 44
- 应助: 397 (硕士)
- 贵宾: 0.044
- 金币: 2118.9
- 散金: 10
- 红花: 208
- 帖子: 5633
- 在线: 571.6小时
- 虫号: 1766465
- 注册: 2012-04-19
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
- 管辖: 生物科学综合
5楼2013-10-24 00:58:34
凌波丽
专家顾问 (知名作家)
-
专家经验: +218 - MolEPI: 44
- 应助: 397 (硕士)
- 贵宾: 0.044
- 金币: 2118.9
- 散金: 10
- 红花: 208
- 帖子: 5633
- 在线: 571.6小时
- 虫号: 1766465
- 注册: 2012-04-19
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
- 管辖: 生物科学综合
6楼2013-10-24 00:59:38
凌波丽
专家顾问 (知名作家)
-
专家经验: +218 - MolEPI: 44
- 应助: 397 (硕士)
- 贵宾: 0.044
- 金币: 2118.9
- 散金: 10
- 红花: 208
- 帖子: 5633
- 在线: 571.6小时
- 虫号: 1766465
- 注册: 2012-04-19
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
- 管辖: 生物科学综合
7楼2013-10-24 01:04:53
avex514
铁虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 5237.8
- 散金: 28
- 红花: 1
- 帖子: 267
- 在线: 25小时
- 虫号: 733636
- 注册: 2009-03-28
- 性别: GG
- 专业: 药理学
9楼2013-10-24 09:52:27
凌波丽
专家顾问 (知名作家)
-
专家经验: +218 - MolEPI: 44
- 应助: 397 (硕士)
- 贵宾: 0.044
- 金币: 2118.9
- 散金: 10
- 红花: 208
- 帖子: 5633
- 在线: 571.6小时
- 虫号: 1766465
- 注册: 2012-04-19
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
- 管辖: 生物科学综合
10楼2013-10-24 23:11:24
