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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 请教提取拟南芥叶片总蛋白SDS-PAGE时较亮的条带对应的蛋白？
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huzhihong-

新虫 (小有名气)

[交流] 请教提取拟南芥叶片总蛋白SDS-PAGE时较亮的条带对应的蛋白？

如图所示提的野生型拟南芥和突变体拟南芥的总蛋白，通过maker对比可以找到RBCL和RBCS对应的条带，明显突变体中RBCL和RBCS含量减少了，但奇怪的是中间那条带是什么蛋白？感觉与叶绿体有关！还有一个奇怪的问题就是8%的胶跑电泳时看不到这么明显的带，12%胶跑电泳时这条带就非常明显。有没有高手可以解答？

DSCN1924副本.jpg
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1楼 2013-04-14 11:47:30
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
huzhihong-(金币+2): 谢谢参与
如果是和叶绿体有关，可能是LHC。至于你说的用8%的胶看不到明显的带，我觉得不大可能吧，样品处理是一样的吗？会不会是8%的胶吧RbcS跑出去了？
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2楼2013-04-15 00:46:41
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userhung

禁虫 (文学泰斗)
★
huzhihong-(金币+2): 谢谢参与
不太像哦~~~~~~~~~~~~~~~~
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4楼2013-04-15 06:27:37
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xiedt

金虫 (著名写手)
★
huzhihong-(金币+2): 谢谢参与
祝福，祝福，祝福！努力发论文！
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6楼2013-04-15 07:03:15
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匿名

用户注销 (著名写手)
★
huzhihong-(金币+2): 谢谢参与
本帖仅楼主可见
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7楼2013-04-15 07:10:50
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huzhihong-

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-15 00:46:41
如果是和叶绿体有关，可能是LHC。至于你说的用8%的胶看不到明显的带，我觉得不大可能吧，样品处理是一样的吗？会不会是8%的胶吧RbcS跑出去了？

的确是这样的，同一个样品用不同的胶跑，12%的胶这条带就特别明显，8%的时候这条带不明显。
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12楼2013-04-15 08:05:55
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huzhihong-

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 彬心玉壶 at 2013-04-15 07:10:50
为什么Mutant三个泳道第一个明显比其他的少？
最开始点进去的蛋白质的量是一样的吗？
再说了，你只要关注自己想要的就醒了，其他的光看分子量根本没法判断。再说了，
可以WSTERN BLOT用抗体检测。

上样量基本差不多，因为是叶绿体的突变体所以RBCL和RBCS都相应的减少了！我关注的是与叶绿体有关的蛋白，感觉这个蛋白与RBCL和RBCS变化趋势一致，所以认为它可能也是一个叶绿体相关的蛋白。
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13楼2013-04-15 08:09:13
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茅塞顿开

至尊木虫 (文坛精英)
★
huzhihong-(金币+2): 谢谢参与
顶起
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14楼2013-04-15 08:23:28
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xiedt

金虫 (著名写手)
加油!加油!加油!相信你一定能成为科研大牛，到时候多多传受经验！
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17楼2013-04-15 09:34:55
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zhenwuhuang

至尊木虫 (文学泰斗)
★
huzhihong-(金币+2): 谢谢参与
可以用west-blot 检验一下。
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20楼2013-04-15 10:39:51
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々暧-〃

版主 (文学泰斗)
★
huzhihong-(金币+2): 谢谢参与
祝福祝福~~~~~
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21楼2013-04-15 12:29:35
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guxinhan123

银虫 (正式写手)
★
huzhihong-(金币+2): 谢谢参与
切了或者2d后挖点做串联质谱
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22楼2013-04-15 18:31:48
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
13楼: Originally posted by huzhihong- at 2013-04-15 08:09:13
上样量基本差不多，因为是叶绿体的突变体所以RBCL和RBCS都相应的减少了！我关注的是与叶绿体有关的蛋白，感觉这个蛋白与RBCL和RBCS变化趋势一致，所以认为它可能也是一个叶绿体相关的蛋白。...

你关注叶绿体蛋白，你跑的样品是叶绿体总蛋白吗？
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23楼2013-04-16 03:48:42
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huzhihong-

新虫 (小有名气)
引用回帖:
23楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-16 03:48:42
你关注叶绿体蛋白，你跑的样品是叶绿体总蛋白吗？...

没有啊，直接跑的总蛋白看看有没有变化，不是提取的叶绿体总蛋白！
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25楼2013-04-17 16:11:35
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pingdan516

铁虫 (小有名气)
★
huzhihong-(金币+2): 谢谢参与
做转基因的大侠注意了，你们还在为去别的实验室借用荧光显微镜而烦恼吗？你们还在为用一下荧光显微镜而苦苦排队吗？现在一个“手电筒”和一副“眼罩”，无需底物显色，就可轻松检测转基因生物。产品优势：
1. 小巧、携带方便，便于野外检测
2. 检测效率高，黑暗中检测一目了然
3. LED寿命10000h，且系统稳定，可用于长时间（>4h）使用
4. 直接检测，而无需用底物显色，所以安全，对被检测对象无伤害

用途：
用于检测、筛选转绿色荧光蛋白（GFP）和红色荧光蛋白（DsRed）基因的植物、动物及微生物，如水稻、玉米、斑马鱼、小鼠、细菌、真菌等等
详情请咨询刘经理，手机：18612081281
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27楼2015-02-04 16:31:41
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yanchao1188

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你好，在吗？请问你的植物总蛋白是怎么提取的？能给个具体的参考方法吗？谢谢
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28楼2015-12-08 11:30:57
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yanchao1188

铁杆木虫 (正式写手)
你好，在吗？请问你的植物总蛋白是怎么提取的？能给个具体的参考方法吗？谢谢
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29楼2015-12-08 11:32:21
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xiamuxi

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
28楼: Originally posted by yanchao1188 at 2015-12-08 11:30:57
你好，在吗？请问你的植物总蛋白是怎么提取的？能给个具体的参考方法吗？谢谢

您好，今天看到您的帖子的回复，过去很久很久了。。目前也在做植物总蛋白提取，请问您当时是用什么方法啊？
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30楼2018-05-30 15:45:58
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简单回复
Htab3楼
2013-04-15 01:23   回复  
huzhihong-(金币+2): 谢谢参与
祝福
yaoyao1455楼
2013-04-15 06:49   回复  
huzhihong-(金币+2): 谢谢参与
小齐seven8楼
2013-04-15 07:13   回复  
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dengxuan19939楼
2013-04-15 07:34   回复  
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亦岳986310楼
2013-04-15 07:40   回复  
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失落的豇豆11楼
2013-04-15 08:00   回复  
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wly011415楼
2013-04-15 08:40   回复  
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readytogo16楼
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northvoyager18楼
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