24小时热门版块排行榜    

查看: 1494  |  回复: 5

mengyouren

铜虫 (著名写手)

[求助] 单点突变后跑SDS-PAGE目的条带的分子量小了一半 已有3人参与

如题,我对目的基因做了多个单点突变,结果发现两个突变体在做蛋白电泳时目的条带的位置和其他突变体及原始蛋白相比有很明显的位移,按蛋白标准计算分子量差不多差了一倍,我用的是pET32a载体在E.coli BL21 (trixB)中表达的,细胞破碎时这两个突变体比其他的更澄清些,请教高人给指点一下,是什么原因导致的,谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ptttmt

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
mengyouren: 金币+30, 有帮助 2015-05-20 16:38:51
补充完信息才好分析啊,你的蛋白多大,融合了32a标签蛋白后多大,突变体跑出来多大,有图片否?发上来瞄瞄

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-01-15 19:02:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

红卫大兵

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
mengyouren: 金币+30 2015-05-20 16:39:09
突变不会是把氨基酸系列变成终止氨基酸了吧?
3楼2015-01-15 19:06:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mengyouren

铜虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ptttmt at 2015-01-15 19:02:02
补充完信息才好分析啊,你的蛋白多大,融合了32a标签蛋白后多大,突变体跑出来多大,有图片否?发上来瞄瞄

我的蛋白90kDa左右,我做了几个单点突变,大多数正常,只有两个突变后分子量变成45kDa左右了
4楼2015-01-16 14:07:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mengyouren

铜虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 红卫大兵 at 2015-01-15 19:06:49
突变不会是把氨基酸系列变成终止氨基酸了吧?

都是突变成甘氨酸的
5楼2015-01-16 14:08:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

叶晓波1572

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
mengyouren: 金币+40, 有帮助 2015-05-20 16:39:20
这个情况我也觉得可能是突变成终止密码了 楼主仔细检查一下突变后的序列。
6楼2015-04-14 14:06:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 mengyouren 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料与化工一志愿南昌大学327求调剂推荐 +7 Ncdx123456 2026-03-13 8/400 2026-03-16 12:15 by karry wen
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-16 3/150 2026-03-16 10:07 by 求调剂zz
[考研] 344求调剂 +3 knight344 2026-03-16 3/150 2026-03-16 09:42 by 无际的草原
[文学芳草园] 伙伴们,祝我生日快乐吧 +15 myrtle 2026-03-10 24/1200 2026-03-15 21:16 by 苏州_逗号
[考研] 268求调剂 +5 一定有学上- 2026-03-14 6/300 2026-03-14 22:20 by 运气yunqi
[基金申请] 面上和青基一样限30页不合理 +5 wowsunflower 2026-03-10 7/350 2026-03-14 17:21 by kingkocxr
[考研] 266求调剂 +4 学员97LZgn 2026-03-13 4/200 2026-03-14 08:37 by zhukairuo
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工296分求调剂 +16 稻妻小编 2026-03-09 18/900 2026-03-14 02:00 by JourneyLucky
[考研] 一志愿天津大学,英一数二305分求调剂,四六级已过 +8 小小番的茄 2026-03-09 8/400 2026-03-14 01:53 by JourneyLucky
[考研] 调剂 +3 13853210211 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:47 by JourneyLucky
[考研] 271求调剂 +10 生如夏花… 2026-03-11 10/500 2026-03-14 00:35 by 卖报员小雨
[考研] 招收0805(材料)调剂 +3 18595523086 2026-03-13 3/150 2026-03-14 00:33 by 123%、
[考研] 279求调剂 +3 抓着星星的女孩 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:47 by userper
[考研] [0860]321分求调剂,ab区皆可 +4 宝贵热 2026-03-13 4/200 2026-03-13 22:01 by 星空星月
[考研] 26调剂/材料/英一数二/总分289/已过A区线 +6 步川酷紫123 2026-03-13 6/300 2026-03-13 21:59 by 星空星月
[考研] 304求调剂 +7 7712b 2026-03-13 7/350 2026-03-13 21:42 by peike
[考研] 085600材料与化工 309分请求调剂 +7 dtdxzxx 2026-03-12 8/400 2026-03-13 14:43 by jxchenghu
[考研] 296求调剂 +3 大口吃饭 身体健 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:31 by 学员8dgXkO
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-12 4/200 2026-03-12 19:33 by 求调剂zz
[考研] 294 英二数二物化 求调剂 +6 米饭团不好吃 2026-03-09 6/300 2026-03-09 23:55 by barlinike
信息提示
请填处理意见