24小时热门版块排行榜    

查看: 1516  |  回复: 5

mengyouren

铜虫 (著名写手)

[求助] 单点突变后跑SDS-PAGE目的条带的分子量小了一半 已有3人参与

如题,我对目的基因做了多个单点突变,结果发现两个突变体在做蛋白电泳时目的条带的位置和其他突变体及原始蛋白相比有很明显的位移,按蛋白标准计算分子量差不多差了一倍,我用的是pET32a载体在E.coli BL21 (trixB)中表达的,细胞破碎时这两个突变体比其他的更澄清些,请教高人给指点一下,是什么原因导致的,谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ptttmt

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
mengyouren: 金币+30, 有帮助 2015-05-20 16:38:51
补充完信息才好分析啊,你的蛋白多大,融合了32a标签蛋白后多大,突变体跑出来多大,有图片否?发上来瞄瞄

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-01-15 19:02:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

红卫大兵

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
mengyouren: 金币+30 2015-05-20 16:39:09
突变不会是把氨基酸系列变成终止氨基酸了吧?
3楼2015-01-15 19:06:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mengyouren

铜虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ptttmt at 2015-01-15 19:02:02
补充完信息才好分析啊,你的蛋白多大,融合了32a标签蛋白后多大,突变体跑出来多大,有图片否?发上来瞄瞄

我的蛋白90kDa左右,我做了几个单点突变,大多数正常,只有两个突变后分子量变成45kDa左右了
4楼2015-01-16 14:07:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mengyouren

铜虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 红卫大兵 at 2015-01-15 19:06:49
突变不会是把氨基酸系列变成终止氨基酸了吧?

都是突变成甘氨酸的
5楼2015-01-16 14:08:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

叶晓波1572

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
mengyouren: 金币+40, 有帮助 2015-05-20 16:39:20
这个情况我也觉得可能是突变成终止密码了 楼主仔细检查一下突变后的序列。
6楼2015-04-14 14:06:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 mengyouren 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +3 暗涌afhb 2026-03-16 3/150 2026-03-20 00:28 by 河南大学校友
[考研] 286分人工智能专业请求调剂愿意跨考! +3 lemonzzn 2026-03-17 3/150 2026-03-19 23:58 by 23Postgrad
[考研] 307求调剂 +9 冷笙123 2026-03-17 9/450 2026-03-19 22:44 by 学员8dgXkO
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +14 陌の森林 2026-03-18 14/700 2026-03-19 22:38 by 学员8dgXkO
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 10/500 2026-03-19 16:05 by 余麟余
[考研] 一志愿北京化工大学0703化学318分,有科研经历,求调剂 +3 一瓶苯甲酸 2026-03-14 3/150 2026-03-19 15:17 by 尽舜尧1
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +5 枫桥ZL 2026-03-18 7/350 2026-03-19 14:52 by 功夫疯狂
[考研] 求调剂,一志愿:南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕,总分289分 +3 @taotao 2026-03-19 3/150 2026-03-19 14:07 by peike
[考研] 287求调剂 +3 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-19 12:32 by peike
[考博] 环境领域全国重点实验室招收博士1-2名 +3 QGZDSYS 2026-03-13 5/250 2026-03-18 11:13 by QGZDSYS
[考研] 265求调剂 +3 梁梁校校 2026-03-17 3/150 2026-03-18 09:12 by zhukairuo
[考研] 332求调剂 +6 Zz版 2026-03-13 6/300 2026-03-17 17:03 by ruiyingmiao
[考研] 有没有道铁/土木的想调剂南林,给自己招师弟中~ +3 TqlXswl 2026-03-16 7/350 2026-03-17 15:23 by TqlXswl
[论文投稿] 有没有大佬发小论文能带我个二作 +3 增锐漏人 2026-03-17 4/200 2026-03-17 09:26 by xs74101122
[考研] 东南大学364求调剂 +5 JasonYuiui 2026-03-15 5/250 2026-03-16 21:28 by 木瓜膏
[考研] 0854控制工程 359求调剂 可跨专业 +3 626776879 2026-03-14 9/450 2026-03-16 17:42 by 626776879
[考研] 求老师收留调剂 +4 jiang姜66 2026-03-14 5/250 2026-03-15 20:11 by Winj1e
[考研] 复试调剂 +3 呼呼?~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
[考研] 一志愿哈工大材料324分求调剂 +5 闫旭东 2026-03-14 5/250 2026-03-14 14:53 by 木瓜膏
[考研] 304求调剂 +7 7712b 2026-03-13 7/350 2026-03-13 21:42 by peike
信息提示
请填处理意见