24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 3596  |  回复: 10

朱青青1988

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助 sds-page 条带虚,marker 最后一条带拖尾

如图,我的marker最后一条带很丑,蛋白条带很虚,很淡不清楚,我的电压80V一个小时,120一个半小时 我是在冰上跑的,蛋白大概17kd .我的buffer 是新的,应该不是样品的问题,以前也跑过没有,没有这种情况。我的分离胶15%
求助 sds-page 条带虚,marker 最后一条带拖尾
DSC09604.JPG

[ Last edited by 朱青青1988 on 2013-5-24 at 21:21 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mitocam

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
朱青青1988(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-25 18:46:26
没有问题,我的MWM经常都是这样。

我发现有时候新鲜的样品的带很sharp,放了几天就虚了,加入DTT后有好转,可能蛋白质氧化了。不过一般不介意这些小变化。
2楼2013-05-25 08:28:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
疏水性强的蛋白的带往往不是很sharp。你的目的蛋白是膜蛋白吗?
3楼2013-05-25 09:12:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

唐朝豪放男

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
朱青青1988(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-25 18:46:34
浓缩胶太少了,想要好看,配胶的时候浓缩胶多铺点,增加样品在浓缩胶中跑的距离,这样就可以压平了
4楼2013-05-25 11:09:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

朱青青1988

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-05-25 09:12:58
疏水性强的蛋白的带往往不是很sharp。你的目的蛋白是膜蛋白吗?

不是膜蛋白,但是我的mrker 也很拖啊
5楼2013-05-25 13:00:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

朱青青1988

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by mitocam at 2013-05-25 08:28:30
没有问题,我的MWM经常都是这样。

我发现有时候新鲜的样品的带很sharp,放了几天就虚了,加入DTT后有好转,可能蛋白质氧化了。不过一般不介意这些小变化。

可是MRKER也很拖尾啊,是不是还是胶的问题
6楼2013-05-25 13:01:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

朱青青1988

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by mitocam at 2013-05-25 08:28:30
没有问题,我的MWM经常都是这样。

我发现有时候新鲜的样品的带很sharp,放了几天就虚了,加入DTT后有好转,可能蛋白质氧化了。不过一般不介意这些小变化。

可是MRKER也很拖尾啊,是不是还是胶的问题
7楼2013-05-25 13:01:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一月lyj

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
朱青青1988(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-25 18:46:44
我跑的marker有时也是上面打的还挺好,到后面几个就有点虚了。试试减少marker的量。
8楼2013-05-25 17:02:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mitocam

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
朱青青1988: 金币+7, ★★★★★最佳答案 2013-05-27 15:05:00
引用回帖:
7楼: Originally posted by 朱青青1988 at 2013-05-25 13:01:24
可是MRKER也很拖尾啊,是不是还是胶的问题...

应该不是胶的问题,因为其它带还是很sharp的,只有小分子量的蛋白质带变虚,因为小蛋白质受氧化或其它修饰,更容易引起迁移率的变化。

在样品和marker中加些DTT试试。
9楼2013-05-25 18:31:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
朱青青1988: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-05-27 15:04:22
引用回帖:
5楼: Originally posted by 朱青青1988 at 2013-05-25 13:00:17
不是膜蛋白,但是我的mrker 也很拖啊...

小分子量区条带有些虚还算是正常吧。可能是上样buffer中的还原剂量不足或者是分离胶的tris缓冲液的pH不十分准确。
10楼2013-05-26 01:42:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 朱青青1988 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿华南理工大学331分材料求调剂 +10 天下ww 2026-04-09 11/550 2026-04-13 23:25 by pies112
[考研] 求调剂学校 +3 不会吃肉 2026-04-13 3/150 2026-04-13 23:13 by 木鱼.
[考研] 调剂求收留 +31 果然有我 2026-04-10 32/1600 2026-04-13 21:35 by gretl
[考研] 274求调剂 +8 山阿蔓 2026-04-07 8/400 2026-04-13 20:32 by biomen
[考研] 290调剂生物0860 +28 哇哈哈,。 2026-04-11 31/1550 2026-04-13 01:16 by 幸免 ..
[考研] 339求调剂 +8 hanwudada 2026-04-11 9/450 2026-04-12 15:36 by laoshidan
[考研] 电气专硕320求调剂 +6 小麻子111 2026-04-10 6/300 2026-04-12 10:54 by lemon6009
[考研] 316求调剂 +5 想读研究生( ?∵ 2026-04-07 5/250 2026-04-12 00:43 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿郑州大学 22408 305分求调剂 +5 安小满zzz 2026-04-08 5/250 2026-04-12 00:41 by 蓝云思雨
[考研] 化工调剂求导师收留!一志愿失利,踏实肯干,有植物提取科研经历 +20 yzyzx 2026-04-09 21/1050 2026-04-12 00:12 by 小小小小啦啦啦
[考研] 085400 328分 求调剂 +10 喂你一个大橙子 2026-04-09 14/700 2026-04-11 19:53 by lqspecial
[考研] 求调剂 +6 archer.. 2026-04-09 8/400 2026-04-11 10:55 by zhq0425
[考研] 298求调剂 +9 钉叮咚冬瓜 2026-04-07 11/550 2026-04-11 09:35 by zhq0425
[考研] 085506-求调剂-285分 +3 雷欧飞踢 2026-04-08 3/150 2026-04-11 08:37 by zhq0425
[考研] 071000生物学调剂求助 +17 zzzzwww 2026-04-09 20/1000 2026-04-10 15:55 by 求调剂zz
[考研] 301求调剂 +5 149. 2026-04-10 5/250 2026-04-10 15:45 by 柴小白
[考研] 285求调剂 +9 AZMK 2026-04-07 11/550 2026-04-10 15:24 by AZMK
[考研] 282,电气工程专业,求调剂,不挑专业 +9 jggshjkkm 2026-04-10 9/450 2026-04-10 14:55 by 逆水乘风
[考研] 344求调剂 +7 丶风雪夜归人丶 2026-04-09 7/350 2026-04-10 12:05 by pengliang8036
[考研] 计算机11408 287 求调剂 +3 LiLe5 2026-04-07 3/150 2026-04-07 23:15 by shanqishi
信息提示
请填处理意见