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朱青青1988

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助 sds-page 条带虚,marker 最后一条带拖尾

如图,我的marker最后一条带很丑,蛋白条带很虚,很淡不清楚,我的电压80V一个小时,120一个半小时 我是在冰上跑的,蛋白大概17kd .我的buffer 是新的,应该不是样品的问题,以前也跑过没有,没有这种情况。我的分离胶15%
求助 sds-page 条带虚,marker 最后一条带拖尾
DSC09604.JPG

[ Last edited by 朱青青1988 on 2013-5-24 at 21:21 ]
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
朱青青1988: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-05-27 15:04:22
引用回帖:
5楼: Originally posted by 朱青青1988 at 2013-05-25 13:00:17
不是膜蛋白,但是我的mrker 也很拖啊...

小分子量区条带有些虚还算是正常吧。可能是上样buffer中的还原剂量不足或者是分离胶的tris缓冲液的pH不十分准确。
10楼2013-05-26 01:42:16
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查看全部 11 个回答

mitocam

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
朱青青1988(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-25 18:46:26
没有问题,我的MWM经常都是这样。

我发现有时候新鲜的样品的带很sharp,放了几天就虚了,加入DTT后有好转,可能蛋白质氧化了。不过一般不介意这些小变化。
2楼2013-05-25 08:28:30
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
疏水性强的蛋白的带往往不是很sharp。你的目的蛋白是膜蛋白吗?
3楼2013-05-25 09:12:58
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唐朝豪放男

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
朱青青1988(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,感谢你的慷慨解囊,期待你的精彩。 2013-05-25 18:46:34
浓缩胶太少了,想要好看,配胶的时候浓缩胶多铺点,增加样品在浓缩胶中跑的距离,这样就可以压平了
4楼2013-05-25 11:09:29
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