应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 求助 sds-page 条带虚，marker 最后一条带拖尾
111/2返回列表12下一页
查看: 3763  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

朱青青1988

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助 sds-page 条带虚，marker 最后一条带拖尾

如图，我的marker最后一条带很丑，蛋白条带很虚，很淡不清楚，我的电压80V一个小时，120一个半小时 我是在冰上跑的，蛋白大概17kd .我的buffer 是新的，应该不是样品的问题，以前也跑过没有，没有这种情况。我的分离胶15%
求助 sds-page 条带虚，marker 最后一条带拖尾
DSC09604.JPG

[ Last edited by 朱青青1988 on 2013-5-24 at 21:21 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-05-24 21:15:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mitocam

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
朱青青1988(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-25 18:46:26
没有问题，我的MWM经常都是这样。

我发现有时候新鲜的样品的带很sharp，放了几天就虚了，加入DTT后有好转，可能蛋白质氧化了。不过一般不介意这些小变化。
赞一下 回复此楼
2楼2013-05-25 08:28:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
疏水性强的蛋白的带往往不是很sharp。你的目的蛋白是膜蛋白吗？
赞一下 回复此楼
3楼2013-05-25 09:12:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

唐朝豪放男

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
朱青青1988(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-25 18:46:34
浓缩胶太少了，想要好看，配胶的时候浓缩胶多铺点，增加样品在浓缩胶中跑的距离，这样就可以压平了
赞一下 回复此楼
4楼2013-05-25 11:09:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

朱青青1988

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-05-25 09:12:58
疏水性强的蛋白的带往往不是很sharp。你的目的蛋白是膜蛋白吗？

不是膜蛋白，但是我的mrker 也很拖啊
赞一下 回复此楼
5楼2013-05-25 13:00:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

朱青青1988

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by mitocam at 2013-05-25 08:28:30
没有问题，我的MWM经常都是这样。

我发现有时候新鲜的样品的带很sharp，放了几天就虚了，加入DTT后有好转，可能蛋白质氧化了。不过一般不介意这些小变化。

可是MRKER也很拖尾啊，是不是还是胶的问题
赞一下 回复此楼
6楼2013-05-25 13:01:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

朱青青1988

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by mitocam at 2013-05-25 08:28:30
没有问题，我的MWM经常都是这样。

我发现有时候新鲜的样品的带很sharp，放了几天就虚了，加入DTT后有好转，可能蛋白质氧化了。不过一般不介意这些小变化。

可是MRKER也很拖尾啊，是不是还是胶的问题
赞一下 回复此楼
7楼2013-05-25 13:01:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一月lyj

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
朱青青1988(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-25 18:46:44
我跑的marker有时也是上面打的还挺好，到后面几个就有点虚了。试试减少marker的量。
赞一下 回复此楼
8楼2013-05-25 17:02:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mitocam

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
朱青青1988: 金币+7, ★★★★★最佳答案 2013-05-27 15:05:00
引用回帖:
7楼: Originally posted by 朱青青1988 at 2013-05-25 13:01:24
可是MRKER也很拖尾啊，是不是还是胶的问题...

应该不是胶的问题，因为其它带还是很sharp的，只有小分子量的蛋白质带变虚，因为小蛋白质受氧化或其它修饰，更容易引起迁移率的变化。

在样品和marker中加些DTT试试。
赞一下 回复此楼
9楼2013-05-25 18:31:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
朱青青1988: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-05-27 15:04:22
引用回帖:
5楼: Originally posted by 朱青青1988 at 2013-05-25 13:00:17
不是膜蛋白，但是我的mrker 也很拖啊...

小分子量区条带有些虚还算是正常吧。可能是上样buffer中的还原剂量不足或者是分离胶的tris缓冲液的pH不十分准确。
赞一下 回复此楼
10楼2013-05-26 01:42:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 朱青青1988 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 澳大利亚 Murdoch University 全奖博士招生（3个名额）地质化工冶金领域 +45 AI8RaGaPaSCR 2026-08-07 48/2400 2026-08-14 01:45 by HI0ghlI1otLA
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +11 医学老男孩 2026-08-13 29/1450 2026-08-14 00:04 by 大快人心啦
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +3 启萌科技 2026-08-12 11/550 2026-08-13 22:57 by 启萌科技
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +9 Tide man 2026-08-10 10/500 2026-08-13 20:33 by 温淼淼淼
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +4 majunge000 2026-08-11 6/300 2026-08-13 16:50 by 四季常青藤
[基金申请] filecode +14 documentary 2026-08-10 16/800 2026-08-13 16:39 by 润生71
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +9 家与远方 2026-08-10 14/700 2026-08-13 09:41 by 臭臭不臭01
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +22 Lanmanbaby 2026-08-09 36/1800 2026-08-12 22:50 by sdfapple719
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读？ +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭