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[求助]
求助！单体蛋白在SDS-PAGE中出现了倍数关系的大条带！
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| 我的单体蛋白约15.6KD，在与某二肽混合贮存一段时间之后，加Loading buffer、95℃ 5min、高速离心、跑SDS-PAGE,考染脱色后在胶上看到了倍数关系的大条带，求各位帮忙解释。。。。。 |
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myprayer
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wizardfan: 应助指数-1, 这段文字非常眼熟，以后请少复制粘帖，最好能有针对性的回答 2013-04-01 08:41:11
wizardfan: 应助指数-1, 这段文字非常眼熟，以后请少复制粘帖，最好能有针对性的回答 2013-04-01 08:41:11
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一 ：试着看下当时配置浓缩胶和分离胶的参数比例，是不是和你要测的蛋白质样品的分子量大小合适，这个可以参考相关文献或者有蛋白质样品对照库里面有配置浓度的指导。 二：就是胶带里位置梯度的PH浓度是否合理，分离胶的浓度一般情况下比较低，所以合适的PH也是做出perfect胶的利器。 三：就是所选用的染料或自发荧光的问题，选择性的使用考马斯亮蓝R-250通常，银盐染料，violet17或者溴化乙锭等染色，这个你可以看一下之前的实验是怎么进行的。 四：可能是你的胶带分离后暗室X放射自显的时候没有曝光好。 五：当时梳子的之后注射混进去微小的气泡，导致胶带不均匀。 最差的就是和之前有人提供的一样，一些试剂可能是假冒伪劣产品，也不排除这种情况。 |
2楼2013-03-31 22:44:30
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3楼2013-04-01 09:34:22
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