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nicole1124

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】SDS-PAGE有可能看到蛋白二聚体吗? 已有10人参与

跑了SDS胶后做的WB,共转了另一种蛋白后,条带上方出现了很明显的一条带,分子量正好是我的目的蛋白的二倍,可是理论上蛋白二聚体之间的结合方式不是二硫键吗,在跑PAGE时就应该被loading buffer 中的二巯基乙醇打断了啊,还是蛋白结合还有其它方式?蛋白组学的高手指点一下吧~~
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ljsh

铁杆木虫 (著名写手)


plantaqp(金币+1):欢迎发表自己的观点 2010-05-02 23:21
SDS-PAGE,standard protocol 一般见不到蛋白二聚体
2楼2010-05-02 22:42:21
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临风7071

木虫 (正式写手)


plantaqp(金币+1):欢迎发表自己的观点 2010-05-02 23:22
能看到二聚体的,我曾经也碰到过,老师就说蛋白煮过后有可能会形成二聚体的,
3楼2010-05-02 22:49:52
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郑B.CoA

金虫 (正式写手)


plantaqp(金币+1):欢迎发表自己的观点 2010-05-02 23:22
话说蛋白二聚体不是按二硫键结合吧...二聚体属于四级结构了吧
我觉得会不会是楼主的蛋白isoform或者是剪切前体啊
4楼2010-05-02 23:00:12
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plantaqp

金虫 (正式写手)


lstt09nk(金币+1):感谢交流~~ 2010-05-06 09:01:50
nicole1124(金币+2): 2010-06-02 08:46:23
引用回帖:
Originally posted by 郑B.CoA at 2010-05-02 23:00:12:
话说蛋白二聚体不是按二硫键结合吧...二聚体属于四级结构了吧
我觉得会不会是楼主的蛋白isoform或者是剪切前体啊

很多发表的文章上都是 有二聚体这种说法,有一种解释是二硫键的破坏不彻底;当然也很有可能是剪切前体
5楼2010-05-02 23:36:34
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haosmile

金虫 (正式写手)

应该没有吧。上周老师才讲过
6楼2010-05-02 23:59:22
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ligang418

金虫 (正式写手)

能不能回收一下,做个相应的检测。
关注!
7楼2010-05-03 08:22:02
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guoenwen

金虫 (小有名气)

我碰到过SDS-PAGE上有二聚体的情况,样品处理也没有问题,但还是两条带。经过质谱分析两条带的同源性很高。
8楼2010-05-03 08:23:11
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zhouyinggyf

金虫 (正式写手)

一般是见不到,但是也不能确定二硫键被完全打断了呀,我也碰到过这样的情况呢
9楼2010-05-05 22:56:19
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zxl493

铁虫 (小有名气)

可以   但是结构 有变化
10楼2010-05-05 23:25:00
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